കോശവിഭജനം, വീക്കം, രോഗപ്രതിരോധ പ്രവർത്തനം, ഓട്ടോഫാഗി, സ്ട്രെസ് പ്രതികരണം എന്നിവയുൾപ്പെടെ മനുഷ്യശരീരത്തിലെ അവശ്യ പ്രക്രിയകളെ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിന് ഓക്സിഡൻറുകൾ സാധാരണയായി നിയന്ത്രിത രീതിയിലാണ് നിർമ്മിക്കുന്നത്. എന്നിരുന്നാലും, ഈ ഓക്സിഡൻറുകളുടെ അനിയന്ത്രിതമായ ഉൽപ്പാദനം സംഭാവന ചെയ്യും ഓക്സിഡേറ്റീവ് സ്ട്രെസ്സ്, ഇത് സെല്ലുലാർ പ്രവർത്തനത്തെ ബാധിച്ചേക്കാം, ഇത് വിഷാംശം, വിട്ടുമാറാത്ത രോഗം, ക്യാൻസർ എന്നിവയുടെ വികാസത്തിലേക്ക് നയിക്കുന്നു. മനുഷ്യ ശരീരത്തിന്റെ സംരക്ഷിത ആന്റിഓക്‌സിഡന്റ് സംവിധാനങ്ങൾ നിയന്ത്രിക്കുന്നത് ഓക്സിഡന്റുകളോടുള്ള കോശത്തിന്റെ പ്രതികരണത്തെ നിയന്ത്രിക്കുന്ന സുപ്രധാന പാതകളുടെ ഒരു പരമ്പരയാണ്. ന്യൂക്ലിയർ ഫാക്ടർ എറിത്രോയിഡ് 2-അനുബന്ധ ഘടകം, അല്ലെങ്കിൽ Nrf2 എന്നറിയപ്പെടുന്നു, ഓക്സിഡന്റുകളോടുള്ള സെല്ലുലാർ പ്രതിരോധത്തിന്റെ ഉയർന്നുവരുന്ന റെഗുലേറ്ററാണ്. മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ഫംഗ്‌ഷനിൽ Nrf2-ന്റെ ഉയർന്നുവരുന്ന പങ്ക് ചർച്ച ചെയ്യുകയും പ്രകടിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുക എന്നതാണ് ചുവടെയുള്ള ലേഖനത്തിന്റെ ഉദ്ദേശ്യം.
ഉള്ളടക്കം
ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഘടകം NF-E2 p45-മായി ബന്ധപ്പെട്ട ഘടകം 2 (Nrf2; ജീൻ നാമം NFE2L2) ആന്റിഓക്‌സിഡന്റ്, ആൻറി-ഇൻഫ്ലമേറ്ററി, ഡിടോക്‌സിഫിക്കേഷൻ എൻസൈമുകൾ എന്നിവയുൾപ്പെടെയുള്ള സൈറ്റോപ്രൊട്ടക്റ്റീവ് പ്രോട്ടീനുകളുടെ വൈവിധ്യമാർന്ന ശൃംഖലകളുടെ ജീൻ പ്രകടനത്തെ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിലൂടെ സമ്മർദ്ദത്തിന്റെ സാഹചര്യങ്ങളിൽ പൊരുത്തപ്പെടാനും അതിജീവിക്കാനും അനുവദിക്കുന്നു. കേടായ മാക്രോമോളിക്യൂളുകൾ നന്നാക്കാനോ നീക്കം ചെയ്യാനോ സഹായിക്കുന്ന പ്രോട്ടീനുകളായി. Glutathione, thioredoxin, NADPH എന്നിവയുടെ ജൈവസംശ്ലേഷണം, ഉപയോഗം, പുനരുജ്ജീവിപ്പിക്കൽ എന്നിവ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിലൂടെയും മൈറ്റോകോൺഡ്രിയ, NADPH ഓക്സിഡേസ് എന്നിവയുടെ പ്രതിപ്രവർത്തന ഓക്സിജന്റെ ഉത്പാദനം നിയന്ത്രിക്കുന്നതിലൂടെയും സെല്ലുലാർ റെഡോക്സ് ഹോമിയോസ്റ്റാസിസ് പരിപാലിക്കുന്നതിൽ Nrf2 നിർണ്ണായക പങ്ക് വഹിക്കുന്നു. ഹോമിയോസ്റ്റാറ്റിക് അവസ്ഥയിൽ, Nrf2 മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ മെംബ്രൺ പൊട്ടൻഷ്യൽ, ഫാറ്റി ആസിഡ് ഓക്‌സിഡേഷൻ, ശ്വാസോച്ഛ്വാസത്തിനുള്ള സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റുകളുടെ ലഭ്യത (NADH, FADH2/succinate), എടിപി സിന്തസിസ് എന്നിവയെ ബാധിക്കുന്നു. സമ്മർദ്ദത്തിന്റെയോ വളർച്ചാ ഘടകം ഉത്തേജനത്തിന്റെയോ സാഹചര്യങ്ങളിൽ, Nrf2 ന്റെ സജീവമാക്കൽ, അൺകൂപ്പിംഗ് പ്രോട്ടീൻ 3 ന്റെ ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷനൽ അപ്റെഗുലേഷൻ വഴി മൈറ്റോകോൺഡ്രിയയിലെ വർദ്ധിച്ചുവരുന്ന റിയാക്ടീവ് ഓക്സിജൻ സ്പീഷീസ് ഉൽപ്പാദനത്തെ പ്രതിരോധിക്കുകയും ന്യൂക്ലിയർ റെസ്പിറേറ്ററി ഫാക്ടർ 1, പെറോക്സിസോം പ്രൊലിഫെറേറ്റർ-ആക്ടിവേറ്റഡ് റിസപ്റ്റർ എന്നിവയുടെ അളവ് നിലനിർത്തുന്നതിലൂടെ മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ബയോജെനിസിസിനെ സ്വാധീനിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. കോക്ടിവേറ്റർ 1?, അതുപോലെ പ്യൂരിൻ ന്യൂക്ലിയോടൈഡ് ബയോസിന്തസിസ് പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നതിലൂടെ. പ്രകൃതിദത്തമായ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് സൾഫോറഫേൻ പോലുള്ള ഫാർമക്കോളജിക്കൽ Nrf2 ആക്‌റ്റിവേറ്ററുകൾ, മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ പെർമിബിലിറ്റി ട്രാൻസിഷൻ സുഷിരത്തിന്റെയും മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ വീക്കത്തിന്റെയും ഓക്‌സിഡന്റ്-മധ്യസ്ഥത തുറക്കുന്നതിനെ തടയുന്നു. കൗതുകകരമെന്നു പറയട്ടെ, ഒരു സിന്തറ്റിക് 1,4-ഡിഫെനൈൽ-1,2,3-ട്രയാസോൾ സംയുക്തം, യഥാർത്ഥത്തിൽ ഒരു Nrf2 ആക്‌റ്റിവേറ്ററായി രൂപകൽപ്പന ചെയ്‌തിരുന്നു, ഇത് മൈറ്റോഫാഗിയെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നതായി കണ്ടെത്തി, അതുവഴി മൊത്തത്തിലുള്ള മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ഹോമിയോസ്റ്റാസിസിന് സംഭാവന നൽകുന്നു. അതിനാൽ, മൈറ്റോകോൺഡ്രിയയുടെ ഘടനാപരവും പ്രവർത്തനപരവുമായ സമഗ്രതയെ പിന്തുണയ്ക്കുന്നതിൽ Nrf2 ഒരു പ്രമുഖ കളിക്കാരനാണ്, സമ്മർദ്ദത്തിന്റെ സാഹചര്യങ്ങളിൽ ഈ പങ്ക് പ്രത്യേകിച്ചും നിർണായകമാണ്.
അടയാളവാക്കുകൾ: ബയോഎനർജറ്റിക്സ്, സൈറ്റോപ്രൊട്ടക്ഷൻ, കീപ്1, മൈറ്റോകോൺഡ്രിയ, എൻആർഎഫ്2, ഫ്രീ റാഡിക്കലുകൾ
ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഘടകം NF-E2 p45-അനുബന്ധ ഘടകം 2 (Nrf2; ജീൻ നാമം NFE2L2) വൈവിധ്യമാർന്ന സൈറ്റോപ്രൊട്ടക്റ്റീവ് പ്രവർത്തനങ്ങളുള്ള പ്രോട്ടീനുകളെ എൻകോഡിംഗ് ചെയ്യുന്ന ജീനുകളുടെ നെറ്റ്‌വർക്കുകളുടെ പ്രകടനത്തെ നിയന്ത്രിക്കുന്നു. Nrf2 തന്നെ നിയന്ത്രിക്കുന്നത് പ്രാഥമികമായി പ്രോട്ടീൻ സ്ഥിരതയുടെ തലത്തിലാണ്. അടിസ്ഥാന സാഹചര്യങ്ങളിൽ, Nrf2 ഒരു ഹ്രസ്വകാല പ്രോട്ടീനാണ്, അത് തുടർച്ചയായ സർവ്വവ്യാപിത്വത്തിനും പ്രോട്ടിസോമൽ ഡിഗ്രേഡേഷനും വിധേയമാകുന്നു. Nrf2 ന്റെ അപചയത്തിന് കാരണമാകുന്ന മൂന്ന് അറിയപ്പെടുന്ന ubiquitin ligase സിസ്റ്റങ്ങളുണ്ട്. ചരിത്രപരമായി, Nrf2-ന്റെ ആദ്യത്തെ നെഗറ്റീവ് റെഗുലേറ്റർ കണ്ടുപിടിച്ചത് Kelch-like ECH-അസോസിയേറ്റഡ് പ്രോട്ടീൻ 1 (Keap1) [1] ആണ്, Cullin 3 (Cul3)/Rbx1 ubiquitin ligase [2], [3], [ 4]. എല്ലായിടത്തും വ്യാപിക്കുന്നതിനും പ്രോട്ടിസോമൽ ഡിഗ്രേഡേഷനുമായി Nrf1 ടാർഗെറ്റുചെയ്യുന്നതിന് Keap2 വളരെ കാര്യക്ഷമമായ ഒരു ചാക്രിക സംവിധാനം ഉപയോഗിക്കുന്നു, ഈ സമയത്ത് Keap1 തുടർച്ചയായി പുനരുജ്ജീവിപ്പിക്കപ്പെടുന്നു, ഇത് സൈക്കിൾ തുടരാൻ അനുവദിക്കുന്നു (ചിത്രം 1A) [5]. Nrf2 ഗ്ലൈക്കോജൻ സിന്തേസ് കൈനസ് (GSK)3/?-TrCP-ആശ്രിത Cul1 അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള ubiquitin ligase [6], [7] വഴിയുള്ള ഡീഗ്രേഡേഷനും വിധേയമാകുന്നു. എൻഡോപ്ലാസ്മിക് റെറ്റിക്യുലം സ്ട്രെസിന്റെ അവസ്ഥയിൽ, E2 ubiquitin ligase Hrd3 [1] മധ്യസ്ഥതയിലുള്ള ഒരു പ്രക്രിയയിൽ Nrf8 സർവ്വവ്യാപിയാകുകയും തരംതാഴ്ത്തപ്പെടുകയും ചെയ്യുന്നതായി അടുത്തിടെ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെട്ടിരുന്നു.
ഒരു യുബിക്വിറ്റിൻ ലിഗേസ് സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റ് അഡാപ്റ്റർ പ്രോട്ടീനായി സേവിക്കുന്നതിനു പുറമേ, കീപ്1, Nrf2 (ഇൻഡ്യൂസറുകൾ എന്ന് വിളിക്കുന്നു) [9] ന്റെ ചെറിയ-തന്മാത്ര ആക്‌റ്റിവേറ്ററുകളുടെ ഒരു വലിയ നിരയുടെ സെൻസർ കൂടിയാണ്. Keap1 [2], [1] ഉള്ളിലെ നിർദ്ദിഷ്ട സിസ്റ്റൈൻ അവശിഷ്ടങ്ങൾ രാസപരമായി പരിഷ്‌ക്കരിച്ചുകൊണ്ടോ അല്ലെങ്കിൽ Keap10:Nrf11 ബൈൻഡിംഗ് ഇന്റർഫേസിനെ നേരിട്ട് തടസ്സപ്പെടുത്തുന്നതിലൂടെയോ ഇൻഡ്യൂസറുകൾ Nrf1-ന്റെ Keap2-മെഡിയേറ്റഡ് ഡിഗ്രേഡേഷൻ സൈക്കിളിനെ തടയുന്നു [12] [13]. തത്ഫലമായി, Nrf2 ഡീഗ്രേഡ് ചെയ്യപ്പെടുന്നില്ല, ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഘടകം അടിഞ്ഞുകൂടുകയും ന്യൂക്ലിയസിലേക്ക് മാറുകയും ചെയ്യുന്നു (ചിത്രം 1B), അവിടെ അത് ഒരു ചെറിയ മാഫ് പ്രോട്ടീൻ ഉപയോഗിച്ച് ഒരു ഹെറ്ററോഡൈമർ ഉണ്ടാക്കുന്നു; ആന്റിഓക്‌സിഡന്റ്-പ്രതികരണ ഘടകങ്ങളുമായി ബന്ധിപ്പിക്കുന്നു, അതിന്റെ ടാർഗെറ്റ് ജീനുകളുടെ അപ്‌സ്ട്രീം റെഗുലേറ്ററി മേഖലകൾ; കൂടാതെ ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ [14], [15], [16] ആരംഭിക്കുന്നു. Nrf2 ടാർഗെറ്റുകളുടെ ബാറ്ററിയിൽ സെനോബയോട്ടിക് മെറ്റബോളിസത്തിന്റെ എൻസൈമുകൾ, ആന്റിഓക്‌സിഡന്റും ആന്റി-ഇൻഫ്ലമേറ്ററി ഫംഗ്‌ഷനുകളും ഉള്ള പ്രോട്ടീനുകൾ, പ്രോട്ടീസോമൽ സബ്‌യൂണിറ്റുകൾ എന്നിവയും സെല്ലുലാർ റെഡോക്സ് ഹോമിയോസ്റ്റാസിസിനെ നിയന്ത്രിക്കുകയും ഇടനില മെറ്റബോളിസത്തിൽ പങ്കെടുക്കുകയും ചെയ്യുന്ന പ്രോട്ടീനുകൾ ഉൾപ്പെടെ വൈവിധ്യമാർന്ന സൈറ്റോപ്രൊട്ടക്റ്റീവ് പ്രവർത്തനങ്ങളുള്ള പ്രോട്ടീനുകൾ ഉൾപ്പെടുന്നു.
സെല്ലുലാർ റെഡോക്സ് ഹോമിയോസ്റ്റാസിസിന്റെ മാസ്റ്റർ റെഗുലേറ്റർ എന്ന നിലയിൽ Nrf2 ന്റെ പ്രവർത്തനം പരക്കെ അംഗീകരിക്കപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു. ?-ഗ്ലൂട്ടാമൈൽ സിസ്റ്റൈൻ ലിഗേസിന്റെ ഉൽപ്രേരകത്തിന്റെയും നിയന്ത്രണ ഉപയൂണിറ്റുകളുടെയും ജീൻ എക്സ്പ്രഷൻ, റിഡക്‌ഡ് ഗ്ലൂട്ടാത്തയോണിന്റെ (ജിഎസ്‌എച്ച്) ബയോസിന്തസിസിലെ നിരക്ക്-പരിമിതപ്പെടുത്തുന്ന ഘട്ടത്തെ ഉത്തേജിപ്പിക്കുന്ന എൻസൈം, എൻആർഎഫ് 2 നേരിട്ട് നിയന്ത്രിക്കുന്നു [17]. കോശങ്ങളിലേക്ക് സിസ്റ്റിനെ ഇറക്കുമതി ചെയ്യുന്ന സിസ്റ്റം xc- യുടെ xCT ഉപയൂണിറ്റും Nrf2 [18] ന്റെ നേരിട്ടുള്ള ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ലക്ഷ്യമാണ്. സെല്ലിൽ, സിസ്റ്റൈൻ സിസ്റ്റൈനിലേക്ക് പരിവർത്തനം ചെയ്യപ്പെടുന്നു, ഇത് ജിഎസ്എച്ചിന്റെ ബയോസിന്തസിസിന്റെ മുൻഗാമിയാണ്. GSH ബയോസിന്തസിസിൽ അതിന്റെ പങ്ക് കൂടാതെ, ഗ്ലൂട്ടത്തയോൺ റിഡക്റ്റേസ് 2 [1], [19] ന്റെ കോർഡിനേറ്റഡ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷണൽ റെഗുലേഷൻ വഴി ഗ്ലൂട്ടത്തയോണിന്റെ കുറഞ്ഞ അവസ്ഥയിൽ നിലനിർത്തുന്നതിനുള്ള മാർഗ്ഗം Nrf20 നൽകുന്നു, ഇത് NADPH-ൽ നിന്ന് തത്തുല്യമായത് ഉപയോഗിച്ച് ഓക്സിഡൈസ്ഡ് ഗ്ലൂട്ടത്തയോണിനെ GSH ആയി കുറയ്ക്കുന്നു. . ആവശ്യമായ NADPH നാല് പ്രധാന NADPH- ജനറേറ്റിംഗ് എൻസൈമുകൾ നൽകുന്നു, മാലിക് എൻസൈം 1 (ME1), ഐസോസിട്രേറ്റ് ഡീഹൈഡ്രജനേസ് 1 (IDH1), ഗ്ലൂക്കോസ്-6-ഫോസ്ഫേറ്റ് ഡിഹൈഡ്രജനേസ് (G6PD), 6-ഫോസ്ഫോഗ്ലൂക്കോണേറ്റ് ഡീഹൈഡ്രജനേസ് (PGD), ഇവയെല്ലാം Nrf2 (ചിത്രം 2) [21], [22], [23], [24] വഴി ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷനൽ ഭാഗികമായി നിയന്ത്രിക്കപ്പെടുന്നു. കൗതുകകരമെന്നു പറയട്ടെ, ആൽഡിഹൈഡ് ഡൈഹൈഡ്രജനേസിന്റെ [2] സൈറ്റോസോളിക്, മൈക്രോസോമൽ, മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ രൂപങ്ങളുടെ ഇൻഡ്യൂസിബിൾ ജീൻ എക്സ്പ്രഷനും Nrf25 നിയന്ത്രിക്കുന്നു, ഇത് NAD(P)+ ഒരു കോഫാക്ടറായി ഉപയോഗിക്കുന്നു, ഇത് NAD(P)H-ന് കാരണമാകുന്നു. തീർച്ചയായും, Nrf2-knockout (Nrf2-KO) എലികളിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്ത ഭ്രൂണ ഫൈബ്രോബ്ലാസ്റ്റുകളിൽ NADPH-ന്റെയും NADPH/NADP+ അനുപാതത്തിന്റെയും അളവ് അവയുടെ വൈൽഡ്-ടൈപ്പ് (WT) എതിരാളികളിൽ നിന്നുള്ള കോശങ്ങളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ കുറവാണ്, കൂടാതെ Nrf2 നോക്ക് ഡൗണിൽ NADPH ലെവലുകൾ കുറയുന്നു. ഘടനാപരമായി സജീവമായ Nrf2 ഉള്ള കാൻസർ സെൽ ലൈനുകൾ [26]. പ്രതീക്ഷിച്ചതുപോലെ, Nrf2 തകരാറിലായ സെല്ലുകളിൽ GSH ന്റെ അളവ് കുറവാണ്; നേരെമറിച്ച്, ജനിതക അല്ലെങ്കിൽ ഫാർമക്കോളജിക്കൽ മാർഗങ്ങളിലൂടെയുള്ള Nrf2 സജീവമാക്കൽ GSH നിയന്ത്രണത്തിലേക്ക് നയിക്കുന്നു [27], [28], [29]. പ്രധാനമായി, Nrf2 തയോറെഡോക്സിൻ [30], [31], [32], തയോറെഡോക്സിൻ റിഡക്റ്റേസ് 1 [28], [29], [32], [33], സൾഫിറെഡോക്സിൻ [34] എന്നിവയുടെ ജീൻ പ്രകടനത്തെയും നിയന്ത്രിക്കുന്നു. ഓക്സിഡൈസ്ഡ് പ്രോട്ടീൻ തയോളുകൾ കുറയ്ക്കുന്നതിന്.
സെല്ലുലാർ റെഡോക്സ് ഹോമിയോസ്റ്റാസിസിന്റെ മാസ്റ്റർ റെഗുലേറ്റർ എന്ന നിലയിൽ Nrf2 ന്റെ നിർണായക പങ്ക് കണക്കിലെടുക്കുമ്പോൾ, WT സെല്ലുകളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, Nrf2 തകരാറിലായ സെല്ലുകളിൽ റിയാക്ടീവ് ഓക്സിജൻ സ്പീഷിസുകളുടെ (ROS) അളവ് കൂടുതലാണെന്നതിൽ അതിശയിക്കാനില്ല (Nrf2-KO) [35]. ഓക്സിഡേറ്റീവ് സ്ട്രെസ് ഉണ്ടാക്കുന്ന ഏജന്റുമാരുമായുള്ള വെല്ലുവിളിയിൽ ഈ വ്യത്യാസം പ്രത്യേകിച്ചും ശ്രദ്ധേയമാണ്. കൂടാതെ, Nrf2-ൽ കുറവുള്ള കോശങ്ങൾ വിവിധ തരത്തിലുള്ള ഓക്സിഡൻറുകളുടെ വിഷാംശത്തോട് വളരെ സെൻസിറ്റീവ് ആണ്, Nrf2 ഇൻഡ്യൂസറുകളാൽ സംരക്ഷിക്കാൻ കഴിയില്ല, അതേ അവസ്ഥയിൽ WT സെല്ലുകൾക്ക് കാര്യക്ഷമവും ദീർഘകാലവുമായ സംരക്ഷണം നൽകുന്നു [29], [36] , [37]. മൊത്തത്തിലുള്ള സെല്ലുലാർ റെഡോക്സ് ഹോമിയോസ്റ്റാസിസിനു പുറമേ, മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ റെഡോക്സ് ഹോമിയോസ്റ്റാസിസിന്റെ പരിപാലനത്തിനും Nrf2 നിർണ്ണായകമാണ്. അങ്ങനെ, WT യുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, Keap1-KO-യിൽ മൊത്തം മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ NADH പൂൾ ഗണ്യമായി വർദ്ധിക്കുകയും Nrf2-KO സെല്ലുകളിൽ ഗണ്യമായി കുറയുകയും ചെയ്യുന്നു [35].
ലൈവ് സെൽ ഇമേജിംഗ് ഉപയോഗിച്ച്, WT, Nrf2-KO, അല്ലെങ്കിൽ Keap1-knockdown (Keap1-KD) എലികളിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്ത പ്രൈമറി ഗ്ലിയോണൂറോണൽ കോകൾച്ചറുകളിലും ബ്രെയിൻ ടിഷ്യു സ്ലൈസുകളിലും ROS ഉൽപ്പാദനത്തിന്റെ നിരക്ക് ഞങ്ങൾ അടുത്തിടെ നിരീക്ഷിച്ചു [38]. പ്രതീക്ഷിച്ചതുപോലെ, Nrf2-KO സെല്ലുകളിലും ടിഷ്യൂകളിലും അവരുടെ WT എതിരാളികളെ അപേക്ഷിച്ച് ROS ഉൽപ്പാദന നിരക്ക് വേഗത്തിലായിരുന്നു. എന്നിരുന്നാലും, WT-യുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, Keap1-KD സെല്ലുകൾക്ക് ROS ഉൽപ്പാദനത്തിന്റെ ഉയർന്ന നിരക്ക് ഉണ്ടെന്ന് ഞങ്ങൾ അപ്രതീക്ഷിത നിരീക്ഷണം നടത്തി, എന്നിരുന്നാലും WT-യും Keap1-KD ജനിതകരൂപങ്ങളും തമ്മിലുള്ള വ്യത്യാസത്തിന്റെ വ്യാപ്തി WT-യും Nrf2-KO-യും തമ്മിലുള്ളതിനേക്കാൾ ചെറുതായിരുന്നു. . ബ്രെയിൻ പാത്തോളജിയിൽ ഉൾപ്പെട്ടിരിക്കുന്ന രണ്ട് NADPH ഓക്സിഡേസ് (NOX) ഐസോഫോമുകളുടെ കാറ്റലറ്റിക് ഉപഘടകങ്ങളായ NOX2, NOX4 എന്നിവയുടെ mRNA ലെവലുകൾ ഞങ്ങൾ വിശകലനം ചെയ്തു, Nrf2 കുറവുള്ള സാഹചര്യങ്ങളിൽ NOX2 ഗണ്യമായി വർദ്ധിക്കുന്നതായി കണ്ടെത്തി, Nrf4 ചെയ്യുമ്പോൾ NOX2 നിയന്ത്രിക്കപ്പെടുന്നു. ചെറിയ അളവിൽ ആണെങ്കിലും, ഘടനാപരമായി സജീവമാണ്. അളവനുസരിച്ച്, മ്യൂട്ടന്റ് എലികളിൽ നിന്നുള്ള കോശങ്ങളിലെയും ടിഷ്യൂകളിലെയും നിയന്ത്രണത്തിന്റെ വ്യാപ്തി ROS ഉൽ‌പാദനത്തിലെ അനുബന്ധ വർദ്ധനവിന് സമാന്തരമാണ് [38]. രസകരമെന്നു പറയട്ടെ, Nrf2 NADPH ഓക്സിഡേസിനെ നിയന്ത്രിക്കുക മാത്രമല്ല, NADPH ഓക്സിഡേസ് നിർമ്മിക്കുന്ന ROS-ന് പൾമണറി എപ്പിത്തീലിയൽ സെല്ലുകളിലും കാർഡിയോമയോസൈറ്റുകളിലും [2], [39] കാണിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ Nrf40 സജീവമാക്കാൻ കഴിയും. കൂടാതെ, Nrf2-ന്റെ NADPH ഓക്സിഡേസ്-ആശ്രിത സജീവമാക്കൽ, വിട്ടുമാറാത്ത മർദ്ദം ഓവർലോഡ് സമയത്ത് മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ കേടുപാടുകൾക്കും ഹൃദയത്തിലെ കോശങ്ങളുടെ മരണത്തിനും എതിരായ സംരക്ഷണത്തിനുള്ള ഒരു പ്രധാന എൻഡോജെനസ് മെക്കാനിസം ആണെന്ന് അടുത്തിടെയുള്ള ഒരു പഠനം തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട് [41].
NADPH ഓക്സിഡേസിന്റെ ഉത്തേജക പ്രവർത്തനത്തിന് പുറമേ, ROS-ന്റെ മറ്റൊരു പ്രധാന ഇൻട്രാ സെല്ലുലാർ സ്രോതസ്സാണ് മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ശ്വസനം. മൈറ്റോകോൺഡ്രിയ-നിർദ്ദിഷ്ട അന്വേഷണം MitoSOX ഉപയോഗിച്ച്, പ്രാഥമിക glioneuronal cocultural cocultural cocultural-ലെ മൊത്തത്തിലുള്ള ROS ഉൽ‌പാദനത്തിൽ മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ഉത്ഭവത്തിന്റെ ROS-ന്റെ സംഭാവന ഞങ്ങൾ പരിശോധിച്ചു. WT, Nrf2-KO, അല്ലെങ്കിൽ Keap1-KD എലികളിൽ നിന്ന് [38]. പ്രതീക്ഷിച്ചതുപോലെ, Nrf2-KO സെല്ലുകൾക്ക് WT-നേക്കാൾ ഉയർന്ന മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ROS ഉൽ‌പാദന നിരക്ക് ഉണ്ടായിരുന്നു. മൊത്തത്തിലുള്ള ആർ‌ഒ‌എസ് ഉൽ‌പാദനത്തിനായുള്ള കണ്ടെത്തലുകളുമായി യോജിച്ച്, കീപ്1-കെ‌ഡിയിലെ മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ആർ‌ഒ‌എസ് ഉൽ‌പാദന നിരക്കും WT സെല്ലുകളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ ഉയർന്നതാണ്. പ്രധാനമായി, കോംപ്ലക്സ് I-നെ റോട്ടനോൺ ഉപയോഗിച്ച് തടയുന്നത് WT, Keap1-KD സെല്ലുകളിൽ മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ROS ഉൽ‌പാദനത്തിൽ ഗണ്യമായ വർദ്ധനവിന് കാരണമായി, പക്ഷേ Nrf2-KO സെല്ലുകളിൽ ഫലമുണ്ടായില്ല. പൈറുവേറ്റ് ചേർത്തതിന് ശേഷം WT സെല്ലുകളിൽ മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ROS ഉൽ‌പാദനത്തിൽ പ്രതീക്ഷിക്കുന്ന വർദ്ധനവിന് വിപരീതമായി (NADH-ന്റെ ലഭ്യത വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിനും മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ മെംബ്രൺ സാധ്യത വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിനും ശ്വസനം സാധാരണമാക്കുന്നതിനും), Nrf2-KO സെല്ലുകളിൽ ROS-ന്റെ ഉത്പാദനം കുറഞ്ഞു. ഈ കണ്ടെത്തലുകൾ ഒന്നിച്ച്, Nrf2 ന്റെ അഭാവത്തിൽ ശക്തമായി സൂചിപ്പിക്കുന്നു: (i) കോംപ്ലക്സ് I യുടെ പ്രവർത്തനം തകരാറിലാകുന്നു, (ii) കോംപ്ലക്സ് I യുടെ പ്രവർത്തനരഹിതമായ പ്രവർത്തനം സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റുകളുടെ പരിമിതി മൂലമാണ്, കൂടാതെ (iii) കോംപ്ലക്‌സിന്റെ പ്രവർത്തനരഹിതമായ പ്രവർത്തനം മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ROS ഉൽപാദനം വർദ്ധിക്കുന്നതിനുള്ള പ്രധാന കാരണങ്ങളിലൊന്നാണ് ഞാൻ, സങ്കീർണ്ണമായ II-ൽ നിന്നുള്ള ഇലക്ട്രോൺ പ്രവാഹം വിപരീതമാകാം.
മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ മെംബ്രൻ പൊട്ടൻഷ്യൽ (??m) മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ആരോഗ്യത്തിന്റെയും കോശത്തിന്റെ ഉപാപചയ നിലയുടെയും സാർവത്രിക സൂചകമാണ്. ആരോഗ്യമുള്ള ഒരു കോശത്തിൽ, ??m പരിപാലിക്കുന്നത് മൈറ്റോകോണ്ട്രിയൽ റെസ്പിറേറ്ററി ചെയിൻ ആണ്. രസകരമെന്നു പറയട്ടെ, ഈസ്ട്രജൻ റിസപ്റ്റർ-നെഗറ്റീവ് നോൺടൂമോറിജെനിക് ഹ്യൂമൻ ബ്രെസ്റ്റ് എപിത്തീലിയൽ MCF10A സെൽ ലൈൻ കൾച്ചർ അധിഷ്ഠിത പ്രോട്ടിയോമിക്സ് പഠനത്തിൽ അമിനോ ആസിഡുകളുള്ള ഒരു സ്ഥിരതയുള്ള ഐസോടോപിക് ലേബലിംഗ് കാണിക്കുന്നത് മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ഇലക്ട്രോൺ ട്രാൻസ്പോർട്ട് ചെയിൻ ഘടകം NDUFA4 ഫാർമക്കോളജിക്കൽ ആക്ടിവേഷൻ വഴി നിയന്ത്രിക്കപ്പെടുന്നു എന്നാണ്. Nrf2-ന്റെ ജനിതക നിയന്ത്രണം (Keap2 knockdown വഴി) COX1, COX2I4 എന്നീ സൈറ്റോക്രോം സി ഓക്സിഡേസ് ഉപയൂണിറ്റുകളുടെ നിയന്ത്രണം കുറയ്ക്കുന്നതിലേക്ക് നയിക്കുന്നു [1]. ദ്വിമാന ജെൽ ഇലക്‌ട്രോഫോറെസിസും മാട്രിക്‌സ് അസിസ്റ്റഡ് ലേസർ ഡിസോർപ്‌ഷൻ/അയോണൈസേഷൻ മാസ് സ്‌പെക്‌ട്രോമെട്രിയും ഉപയോഗിച്ച് ലിവർ പ്രോട്ടീമിനെ കുറിച്ചുള്ള ഒരു പഠനം, എടിപി സിന്തേസ് സബ്‌യൂണിറ്റിന്റെ പ്രകടനത്തെ Nrf42 നിയന്ത്രിക്കുന്നതായി കണ്ടെത്തി? [2]. കൂടാതെ, കോംപ്ലക്സ് I [43] ന്റെ പ്രവർത്തനം നിലനിർത്തുന്നതിൽ പങ്കുവഹിക്കുന്ന മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ പ്രോട്ടീൻ DJ-1, ഔഷധശാസ്ത്രപരമോ ജനിതകമോ ആയ പ്രവർത്തനത്തിന്റെ ന്യൂറോപ്രൊട്ടക്റ്റീവ് ഇഫക്റ്റുകൾ ആണെങ്കിലും Nrf44 [2], [45] സ്ഥിരപ്പെടുത്തുന്നതായി റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്. Nrf46-ന്റെ DJ-2 [1] സ്വതന്ത്രമാണ്. എന്നിരുന്നാലും, മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ പ്രവർത്തനത്തിനുള്ള ഈ നിരീക്ഷണങ്ങളുടെ അനന്തരഫലങ്ങൾ അന്വേഷിക്കപ്പെട്ടിട്ടില്ല.
Nrf2 ന്യൂനതയുടെ അവസ്ഥയിൽ സങ്കീർണ്ണമായ I-ന്റെ പ്രവർത്തനരഹിതമായ പ്രവർത്തനവുമായി യോജിച്ച്, Nrf2-KO മൗസ് എംബ്രിയോണിക് ഫൈബ്രോബ്ലാസ്റ്റുകളിലും (MEFs) കൾച്ചർഡ് പ്രൈമറി ഗ്ലിയോണ്യൂറോണൽ സെല്ലുകളിലും അവയുടെ WT എതിരാളികളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ അടിസ്ഥാന ??m കുറവാണ് (ചിത്രം 3, ഇൻസെറ്റ്) [35]. ഇതിനു വിരുദ്ധമായി, Nrf2 ജനിതകമായി ഘടനാപരമായി നിയന്ത്രിക്കപ്പെടുമ്പോൾ (Keap1 ന്റെ knockdown അല്ലെങ്കിൽ knockout വഴി) അടിസ്ഥാനം ??m കൂടുതലാണ്. ജനിതകരൂപങ്ങൾക്കിടയിലെ ??m-ലെ ഈ വ്യത്യാസങ്ങൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നത് ശ്വസനത്തെ Nrf2 ന്റെ പ്രവർത്തനം ബാധിച്ചിരിക്കുന്നു എന്നാണ്. വാസ്‌തവത്തിൽ, ബേസൽ സ്റ്റേറ്റിലെ ഓക്സിജൻ ഉപഭോഗത്തിന്റെ വിലയിരുത്തൽ, WT-യെ അപേക്ഷിച്ച്, Nrf2-KO, Keap1-KO MEF-കളിൽ ഓക്സിജൻ ഉപഭോഗം യഥാക്രമം ~50, ~35% എന്നിങ്ങനെ കുറവാണെന്ന് വെളിപ്പെടുത്തി.
ജനിതകരൂപങ്ങൾക്കിടയിലെ ??m, ശ്വസനം എന്നിവയിലെ ഈ വ്യത്യാസങ്ങൾ മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ശ്വസനത്തിനായുള്ള സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റുകളുടെ ഉപയോഗത്തിന്റെ നിരക്കിൽ പ്രതിഫലിക്കുന്നു. ട്രൈകാർബോക്‌സിലിക് ആസിഡ് (ടിസിഎ) സൈക്കിളിനായുള്ള സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റുകളുടെ പ്രയോഗം (മാലേറ്റ്/പൈറുവേറ്റ്, ഇത് കോംപ്ലക്സ് I സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റ് NADH-ന്റെ ഉത്പാദനം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു) അല്ലെങ്കിൽ കോംപ്ലക്സ് II-ന്റെ അടിവസ്ത്രമായ മീഥൈൽ സക്സിനേറ്റ്, WT രണ്ടിലും ??m-ൽ ഘട്ടം ഘട്ടമായുള്ള വർദ്ധനവിന് കാരണമാകുന്നു. Keap1-KD ന്യൂറോണുകളും, എന്നാൽ Keap1-KD സെല്ലുകളിൽ വർദ്ധനവിന്റെ നിരക്ക് കൂടുതലാണ്. അതിലും പ്രധാനമായി, ഈ ടിസിഎ സൈക്കിൾ സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റുകളോടുള്ള പ്രതികരണത്തിന്റെ രൂപങ്ങൾ രണ്ട് ജനിതകരൂപങ്ങൾക്കിടയിൽ വ്യത്യസ്തമാണ്, അതിലൂടെ അടിവസ്ത്ര കൂട്ടിച്ചേർക്കലിലൂടെ Keap1-KD സെല്ലുകളിൽ ??m ദ്രുതഗതിയിലുള്ള ഉയർച്ചയെ തുടർന്ന് ഒരു പീഠഭൂമിയേക്കാൾ പെട്ടെന്നുള്ള ഇടിവ് സംഭവിക്കുന്നു, ഇത് അസാധാരണമായി സൂചിപ്പിക്കുന്നു. വേഗത്തിലുള്ള അടിവസ്ത്ര ഉപഭോഗം. ഈ കണ്ടെത്തലുകൾ WT MEF നെ അപേക്ഷിച്ച് Keap50-KO-യിലെ [U-70C1] ഗ്ലൂക്കോസിന്റെ 13-മണിക്കൂർ പൾസിന് ശേഷം നിരീക്ഷിച്ച മാലേറ്റ്, പൈറുവേറ്റ്, സക്സിനേറ്റ് എന്നിവയുടെ വളരെ താഴ്ന്ന (6-1%) അളവുകളുമായി അടുത്ത യോജിപ്പിലാണ്. കോശങ്ങൾ [24]. Nrf2-KO ന്യൂറോണുകളിൽ, പൈറുവേറ്റിന് മാത്രമേ ??m വർദ്ധിപ്പിക്കാൻ കഴിയൂ, അതേസമയം മാലേറ്റും മീഥൈൽ സക്സിനേറ്റും നേരിയ ഡിപോളറൈസേഷനു കാരണമാകുന്നു. മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റ് ഉൽ‌പാദനത്തിൽ Nrf2 ന്റെ പ്രഭാവം മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ പ്രവർത്തനത്തെ Nrf2 ബാധിക്കുന്ന പ്രധാന സംവിധാനം ആണെന്ന് തോന്നുന്നു. മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ NADH റെഡോക്സ് സൂചിക (കോംപ്ലക്സ് I-ന്റെ NADH ഉപഭോഗവും TCA സൈക്കിളിലെ NADPH-ന്റെ ഉൽപാദനവും തമ്മിലുള്ള സന്തുലിതാവസ്ഥ) Nrf2-KO സെല്ലുകളിൽ അവയുടെ WT എതിരാളികളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ വളരെ കുറവാണ്, കൂടാതെ, പൂളുകളുടെ പുനരുജ്ജീവന നിരക്കും. കോംപ്ലക്സ് IV (NaCN ന്റെ ഉപയോഗം വഴി) തടയുന്നതിന് ശേഷം NADH, FADH2 എന്നിവ മ്യൂട്ടന്റ് കോശങ്ങളിൽ മന്ദഗതിയിലാണ്.
മ്യൂറിൻ തലച്ചോറിൽ നിന്നും കരളിൽ നിന്നും വേർതിരിച്ചെടുത്ത മൈറ്റോകോൺഡ്രിയയിൽ, കോംപ്ലക്സ് I അല്ലെങ്കിൽ കോംപ്ലക്സ് II എന്നിവയ്‌ക്കായുള്ള സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റുകളുടെ സപ്ലിമെന്റേഷൻ Nrf2 സജീവമാകുമ്പോൾ ഓക്സിജൻ ഉപഭോഗത്തിന്റെ നിരക്ക് കൂടുതൽ ശക്തമാക്കുകയും Nrf2 തടസ്സപ്പെടുമ്പോൾ കാര്യക്ഷമത കുറയുകയും ചെയ്യുന്നു [35]. അതിനാൽ, WT-യെ അപേക്ഷിച്ച് Keap1-KD-യിൽ ഉയർന്ന ഓക്സിജൻ ഉപഭോഗം Malate പ്രേരിപ്പിക്കുന്നു, എന്നാൽ Nrf2-KO മൈറ്റോകോണ്ട്രിയയിൽ അതിന്റെ പ്രഭാവം ദുർബലമാണ്. അതുപോലെ, റോട്ടനോണിന്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ (സങ്കീർണ്ണമായ I തടയപ്പെടുമ്പോൾ), WT-യെ അപേക്ഷിച്ച് കീപ്1-കെഡിയിൽ സുക്സിനേറ്റ് ഓക്സിജൻ ഉപഭോഗം ഒരു പരിധിവരെ സജീവമാക്കുന്നു, അതേസമയം Nrf2-KO മൈറ്റോകോണ്ട്രിയയിലെ പ്രതികരണം കുറയുന്നു. കൂടാതെ, Nrf2-KO പ്രൈമറി ന്യൂറോണൽ കൾച്ചറുകളും എലികളും സങ്കീർണ്ണമായ II ഇൻഹിബിറ്ററായ 3-നൈട്രോപ്രിയോണിക് ആസിഡിന്റെയും മലോനേറ്റിന്റെയും വിഷാംശത്തോട് കൂടുതൽ സെൻസിറ്റീവ് ആണ്, അതേസമയം Nrf2-ഓവർ എക്സ്പ്രെസിംഗ് ആസ്ട്രോസൈറ്റുകളുടെ ഇൻട്രാസ്ട്രിയേറ്റൽ ട്രാൻസ്പ്ലാൻറേഷൻ സംരക്ഷണമാണ് [48], [49]. അതുപോലെ, Nrf2-KO എലികൾ കൂടുതൽ സെൻസിറ്റീവ് ആണ്, അതേസമയം Nrf2-ന്റെ ജനിതകമോ ഫാർമക്കോളജിക്കൽ ആക്റ്റിവേഷനോ സംരക്ഷിത ഫലങ്ങളുണ്ടാക്കുന്നു, 1-മീഥൈൽ-4-ഫീനൈൽ-1 ലെ സങ്കീർണ്ണമായ I ഇൻഹിബിറ്റർ 4-മീഥൈൽ-1,2,3,6-ഫിനൈൽപിരിഡിനിയം അയോൺ മൂലമുണ്ടാകുന്ന ന്യൂറോടോക്സിസിറ്റി, പാർക്കിൻസൺസ് രോഗത്തിന്റെ 49-ടെട്രാഹൈഡ്രോപിരിഡിൻ മൃഗ മാതൃക [50], [51], [52], [53], [54], [55], [56], [57], [58], [59], [60], [61], [XNUMX].
റെസ്പിറേറ്ററി കൺട്രോൾ റേഷ്യോ (ആർ‌സി‌ആർ), സ്റ്റേറ്റ് 3 (എ‌ഡി‌പി-ഉത്തേജിത) യും സ്റ്റേറ്റ് 4 ശ്വസനവും (എ‌ഡി‌പി നിലവിലില്ല) അനുപാതം എൻആർഎഫ് 2 ന്റെ അഭാവത്തിൽ കുറയുന്നു, പക്ഷേ ആർ‌സി‌ആർ കീപ്1-കെ‌ഡിക്കും ഡബ്ല്യു‌ടി മൈറ്റോകോണ്ട്രിയക്കും ഇടയിൽ സമാനമാണ് [35. ]. മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ റെസ്പിറേറ്ററി ചെയിൻ പ്രവർത്തനത്തെ ഓക്സിഡേറ്റീവ് ഫോസ്‌ഫോറിലേഷനുമായി ബന്ധിപ്പിക്കുന്നതിന്റെ അളവിന്റെ സൂചനയാണ് ആർ‌സി‌ആർ എന്നതിനാൽ, കീപ്1-കെ‌ഡി മൈറ്റോകോൺഡ്രിയയിലെ ഉയർന്ന ശ്വസന നിരക്ക് ഓക്സിഡേറ്റീവ് ഫോസ്ഫോറിലേഷന്റെ അൺകപ്ലിംഗ് മൂലമല്ലെന്ന് ഈ കണ്ടെത്തൽ സൂചിപ്പിക്കുന്നു. Nrf2 സജീവമാകുമ്പോൾ ഓക്സിഡേറ്റീവ് ഫോസ്ഫോറിലേഷൻ കൂടുതൽ കാര്യക്ഷമമാകുമെന്ന് ഇത് സൂചിപ്പിക്കുന്നു. Keap1-KD മൈറ്റോകോൺഡ്രിയയിലെ ഉയർന്ന ശ്വസന നിരക്ക് മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ROS ഉൽപാദനത്തിന്റെ ഉയർന്ന അളവുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു [38] ഉയർന്ന ശ്വസന നിരക്ക് ഇലക്ട്രോൺ ചോർച്ച വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് ഇടയാക്കും. എന്നിരുന്നാലും, ഓക്സിഡേറ്റീവ് സ്ട്രെസിന്റെ അവസ്ഥയിൽ, വർദ്ധിച്ച ROS ഉൽപ്പാദനത്തെ അൺകപ്ലിംഗ് പ്രോട്ടീൻ 2 (UCP3) ന്റെ Nrf3-ആശ്രിത ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷണൽ അപ്റെഗുലേഷൻ എതിർക്കുന്നു, ഇത് മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ആന്തരിക സ്‌തരത്തിന്റെ പ്രോട്ടോൺ ചാലകത വർദ്ധിപ്പിക്കുകയും തൽഫലമായി സൂപ്പർഓക്‌സൈഡിന്റെ ഉത്പാദനം കുറയുകയും ചെയ്യുന്നു [62]. ലിപിഡ് പെറോക്‌സിഡേഷൻ ഉൽപ്പന്നമായ 4-ഹൈഡ്രോക്‌സി-2-നോനെനൽ കാർഡിയോമയോസൈറ്റുകളിലെ UCP2-ന്റെ Nrf3-ആശ്രിത നിയന്ത്രണത്തിന് മധ്യസ്ഥത വഹിക്കുന്നുണ്ടെന്ന് ഈയിടെ കാണിച്ചു; ഇസ്കെമിയ റിപ്പർഫ്യൂഷൻ [63] പോലെയുള്ള ഓക്സിഡേറ്റീവ് സ്ട്രെസ് സാഹചര്യങ്ങളിൽ സംരക്ഷണത്തിന് ഇത് വളരെ പ്രധാനമാണ്.
തലച്ചോറിലെയും കരളിലെയും മൈറ്റോകോൺഡ്രിയയിൽ Nrf2-ന്റെ ശ്വാസോച്ഛ്വാസത്തിന്റെ ഫലവുമായി യോജിച്ച്, Nrf2 ന്റെ കുറവ് ഓക്സിഡേറ്റീവ് ഫോസ്ഫോറിലേഷന്റെ കാര്യക്ഷമത കുറയുന്നതിന് കാരണമാകുന്നു (എടിപി സംശ്ലേഷണത്തിനായി ഉപയോഗിക്കുന്ന ഓക്സിജന്റെ എ‌ഡി‌പിയുടെ അനുപാതം കണക്കാക്കിയ പ്രകാരം), അതേസമയം എൻആർഎഫ് 2 സജീവമാക്കൽ (Keap1) -KD) വിപരീത ഫലമുണ്ട് [35]. WT-യുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, Nrf2-ന്റെ ഘടനാപരമായ നിയന്ത്രണങ്ങളുള്ള സെല്ലുകളിൽ ATP ലെവലുകൾ ഗണ്യമായി കൂടുതലാണ്, Nrf2 ഇടിക്കുമ്പോൾ [64] അല്ലെങ്കിൽ തടസ്സപ്പെടുമ്പോൾ [35] കുറയുന്നു. കൂടാതെ, ഓക്സിഡേറ്റീവ് ഫോസ്ഫോറിലേഷൻ (ഒലിഗോമൈസിൻ) അല്ലെങ്കിൽ ഗ്ലൈക്കോളിസിസ് (അയോഡോഅസെറ്റിക് ആസിഡ്) എന്നിവയുടെ ഇൻഹിബിറ്ററുകളുടെ ഉപയോഗം, കോശങ്ങൾ എടിപി ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്ന രീതിയെ Nrf2 മാറ്റുന്നുവെന്ന് വെളിപ്പെടുത്തി. അങ്ങനെ, WT ന്യൂറോണുകളിൽ, ഒലിഗോമൈസിൻ എടിപിയിൽ പൂർണ്ണമായ കുറവുണ്ടാക്കുന്നു, അയോഡോഅസെറ്റിക് ആസിഡിന് കൂടുതൽ ഫലമില്ല. ശ്രദ്ധേയമായി, Nrf2-KO സെല്ലുകളിൽ, ഒലിഗോമൈസിൻ എടിപി അളവ് വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു, അത് സാവധാനത്തിൽ, എന്നാൽ പൂർണ്ണമായും, അയോഡോഅസെറ്റിക് ആസിഡിനാൽ കുറയുന്നു, ഇത് സൂചിപ്പിക്കുന്നത് Nrf2 ന്റെ അഭാവത്തിൽ ഗ്ലൈക്കോളിസിസാണ്, അല്ലാതെ ഓക്സിഡേറ്റീവ് ഫോസ്ഫോറിലേഷനല്ല, ATP ഉൽപാദനത്തിന്റെ പ്രധാന ഉറവിടം. രസകരമെന്നു പറയട്ടെ, Keap1-KD കോശങ്ങളിലെ ഓക്സിഡേറ്റീവ് ഫോസ്ഫോറിലേഷന്റെ കാര്യക്ഷമത വർധിച്ചിട്ടുണ്ടെങ്കിലും, ഒലിഗോമൈസിൻ ചേർക്കുന്നത് ATP ലെവലിൽ ~80% കുറയുന്നതിനും അയോഡോഅസെറ്റിക് ആസിഡ് ~20% കുറയുന്നതിനും കാരണമാകുന്നു. അങ്ങനെ, ഒന്നുകിൽ Nrf2 കുറവ് അല്ലെങ്കിൽ അതിന്റെ ഘടനാപരമായ സജീവമാക്കൽ ഓക്സിഡേറ്റീവ് ഫോസ്ഫോറിലേഷന്റെ സംഭാവന കുറയ്ക്കുകയും എടിപിയുടെ സമന്വയത്തിലേക്കുള്ള ഗ്ലൈക്കോളിസിസിന്റെ സംഭാവന വർദ്ധിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. Nrf2 ഇല്ലാത്തതും മീഡിയത്തിലെ [35] ഗ്ലൂക്കോസിന്റെ സാന്നിധ്യത്തെ ആശ്രയിച്ചുള്ള ??m ന്റെ ആശ്രിതത്വവും ഗ്ലൈക്കോലൈറ്റിക് ഇന്റർമീഡിയറ്റുകളുടെ വർദ്ധിച്ച അളവും (G-6-P, F-6-P) എന്നിവയുമായി പൊരുത്തപ്പെടുമ്പോൾ ഈ പ്രഭാവം പ്രത്യേകിച്ചും പ്രകടമാണ്. , ഡൈഹൈഡ്രോക്‌സിയാസെറ്റോൺ ഫോസ്ഫേറ്റ്, പൈറുവേറ്റ്, ലാക്റ്റേറ്റ്) Nrf2 [24] ന്റെ മുട്ടിന് ശേഷം.
ഒലിഗോമൈസിൻ F1F0-ATPase-നെ തടഞ്ഞതിന് ശേഷമുള്ള ATP ലെവലിലെ വർദ്ധനവ് സൂചിപ്പിക്കുന്നത് Nrf2 ന്റെ അഭാവത്തിൽ F1F0-ATPase പ്രവർത്തിക്കുന്നത് ATP സിന്തേസായിട്ടല്ല, അതായത്, അത് വിപരീതമായി പ്രവർത്തിക്കുന്നു എന്നാണ്. ഈ അവയവത്തിന്റെ പ്രവർത്തനപരമായ സമഗ്രതയ്ക്ക് നിർണായകമായ ??m നിലനിർത്താനുള്ള ശ്രമത്തിൽ ആന്തരിക മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ മെംബ്രണിലുടനീളം പ്രോട്ടോണുകൾ പമ്പ് ചെയ്യേണ്ടതിന്റെ ആവശ്യകതയെ പ്രവർത്തനത്തിലെ അത്തരം വിപരീതഫലം പ്രതിഫലിപ്പിക്കുന്നു. Nrf1-KO സെല്ലുകളിലേക്കുള്ള ഒളിഗോമൈസിൻ അഡ്മിനിസ്ട്രേഷനിൽ നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ട മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ഡിപോളറൈസേഷനും F0F2-ATPase-ന്റെ പ്രവർത്തനത്തിന്റെ വിപരീതഫലം തെളിയിക്കുന്നു, ഇത് അവയുടെ WT അല്ലെങ്കിൽ Keap1- കുറവുള്ള എതിരാളികളിൽ സംഭവിക്കുന്ന ഹൈപ്പർപോളറൈസേഷനിൽ നിന്ന് തികച്ചും വ്യത്യസ്തമാണ് [35]. മൊത്തത്തിൽ, Nrf2 ന്റെ കുറവുള്ള സാഹചര്യങ്ങളിൽ ATP പ്രാഥമികമായി ഗ്ലൈക്കോളിസിസിൽ ഉത്പാദിപ്പിക്കപ്പെടുന്നതായി തോന്നുന്നു, ഈ ATP ??m നിലനിർത്താൻ F1F0-ATPase ഭാഗികമായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.
ഗ്ലൂക്കോസ് ഇല്ലാതെ മീഡിയത്തിൽ കോശങ്ങൾ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യപ്പെടുമ്പോൾ ??m-ൽ Nrf2 കുറവിന്റെ പ്രഭാവം പ്രകടമാണ്, കൂടാതെ WT സെല്ലുകളെ അപേക്ഷിച്ച് ??m Nrf50-KO-യിൽ ~2% കുറവാണ് [35]. ഗ്ലൂക്കോസ് കുറവിന്റെ അവസ്ഥയിൽ, മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ഫാറ്റി ആസിഡ് ഓക്‌സിഡേഷൻ (എഫ്‌എഒ) ശ്വസനത്തിനും ഓക്സിഡേറ്റീവ് ഫോസ്‌ഫോറിലേഷനുമുള്ള സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റുകളുടെ ഒരു പ്രധാന ദാതാവാണ്, ഇത് Nrf2 FAO-യെ ബാധിച്ചേക്കാമെന്ന് നിർദ്ദേശിക്കുന്നു. തീർച്ചയായും, ലോംഗ്-ചെയിൻ (C16:0) സാച്ചുറേറ്റഡ് ഫാറ്റി ആസിഡ് പാൽമിറ്റിക് ആസിഡ്, ഷോർട്ട്-ചെയിൻ (C6:0) ഹെക്‌സനോയിക് ആസിഡ് എന്നിവയ്ക്ക് FAO യുടെ കാര്യക്ഷമത Keap1-KO MEF-കളിലും ഒറ്റപ്പെട്ട ഹൃദയം, കരൾ മൈറ്റോകോൺഡ്രിയ എന്നിവയിലേതിനേക്കാൾ കൂടുതലാണ്. WT എതിരാളികൾ, എന്നാൽ Nrf2-KO സെല്ലുകളിലും മൈറ്റോകോണ്ട്രിയയിലും ഇത് കുറവാണ് [65]. ഈ ഇഫക്റ്റുകൾ മനുഷ്യർക്കും വളരെ പ്രസക്തമാണ്: തീർച്ചയായും, ടിസിഎ സൈക്കിളിന്റെ പ്രവർത്തനവുമായി എഫ്എഒയുടെ മികച്ച സംയോജനത്തെ സൂചിപ്പിക്കുന്ന ഉപാപചയ മാറ്റങ്ങൾ, ക്ലാസിക്കൽ എൻആർഎഫ് 2 ആക്റ്റിവേറ്റർ സൾഫോറഫേനിന്റെ മുൻഗാമിയായ ഗ്ലൂക്കോറഫാനിൻ അടങ്ങിയ ഭക്ഷണങ്ങളുമായുള്ള മനുഷ്യ ഇടപെടൽ പഠനങ്ങളിൽ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്. 66].
മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ FAO യുടെ ആദ്യ ഘട്ടത്തിൽ, ?-കാർബണിന്റെ പ്രോ-ആർ ഹൈഡ്രജൻ, FAD കോഫാക്ടറിനെ FADH2 ലേക്ക് കുറയ്ക്കുന്ന ഒരു ഹൈഡ്രൈഡായി ഇലക്‌ട്രോണുകളെ ശ്വാസോച്ഛ്വാസ ശൃംഖലയിലെ ubiquinone (UbQ) ലേക്ക് മാറ്റുന്നു, ആത്യന്തികമായി ATP ഉൽപാദനത്തിന് സംഭാവന നൽകുന്നു. . ഗ്ലൂക്കോസിന്റെ അഭാവത്തിൽ പാൽമിറ്റോയിൽകാർനിറ്റൈൻ വഴി FAO ഉത്തേജിപ്പിക്കുന്നത് WT, Keap1-KO കോശങ്ങളിലെ ATP ലെവലിൽ പ്രതീക്ഷിക്കുന്ന വർദ്ധനവിന് കാരണമാകുന്നു, Keap1-KO സെല്ലുകളിൽ ATP വർദ്ധനവ് വേഗത്തിലായതിനാൽ, സമാനമായ ചികിത്സ Nrf2-KO-യിൽ ATP മാറ്റങ്ങളൊന്നും ഉണ്ടാക്കുന്നില്ല. MEF-കൾ [65]. ഈ പരീക്ഷണം തെളിയിക്കുന്നത്, Nrf2 ന്റെ അഭാവത്തിൽ, FAO അടിച്ചമർത്തപ്പെടുന്നു, കൂടാതെ, Nrf2 ന്യൂനത [35], [64] എന്ന അവസ്ഥയിൽ ATP ലെവലുകൾ കുറയുന്നതിനുള്ള കാരണങ്ങളിലൊന്നായി FAO യെ അടിച്ചമർത്തുന്നത് സൂചിപ്പിക്കുന്നു.
ശ്രദ്ധേയമായി, Nrf293 നിശബ്‌ദമാക്കിയ ഹ്യൂമൻ 2 T സെല്ലുകൾക്ക് CPT1, CPT2[67] എന്നിവയുടെ താഴ്ന്ന പ്രകടനമാണ് ഉള്ളത്, മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ FAO-യിലെ നിരക്ക് പരിമിതപ്പെടുത്തുന്ന എൻസൈമായ കാർനിറ്റൈൻ പാൽമിറ്റോയിൽ‌ട്രാൻസ്‌ഫെറേസിന്റെ (CPT) രണ്ട് ഐസോഫോമുകൾ. കരാർ പ്രകാരം, WT എലികളെ അപേക്ഷിച്ച് Nrf1-KO യുടെ കരളിൽ Cpt2 ന്റെ mRNA അളവ് കുറവാണ് [68]. കോഎൻസൈം എയിൽ നിന്ന് എൽ-കാർനിറ്റൈനിലേക്ക് നീണ്ട ചെയിൻ ഫാറ്റി അസൈൽ-കോഎയുടെ അസൈൽ ഗ്രൂപ്പിന്റെ കൈമാറ്റം സിപിടി ഉത്തേജിപ്പിക്കുന്നു, അങ്ങനെ സൈറ്റോപ്ലാസ്മിൽ നിന്ന് മൈറ്റോകോണ്ട്രിയയിലേക്ക് അസൈൽകാർനിറ്റൈൻ ഇറക്കുമതി ചെയ്യാൻ അനുവദിക്കുന്നു. ഇത് ഇന്നുവരെ പരിശോധിച്ചിട്ടില്ലെങ്കിലും, CPT1 എക്സ്പ്രഷനിലെ ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷണൽ ഇഫക്റ്റുകൾക്ക് പുറമേ, Nrf2 അതിന്റെ പ്രധാന അലോസ്റ്റെറിക് ഇൻഹിബിറ്ററായ malonyl-CoA യുടെ അളവ് നിയന്ത്രിക്കുന്നതിലൂടെ ഈ എൻസൈമിന്റെ പ്രവർത്തനത്തെയും ബാധിച്ചേക്കാം. കാരണം, നിലവിൽ അവ്യക്തമായ ഒരു സംവിധാനം വഴി, Nrf2, സ്റ്റിറോയിൽ CoA ഡെസാച്ചുറേസ് (SCD) [69], citrate lyase (CL) [69], [70] എന്നിവയുടെ പ്രകടനത്തെ പ്രതികൂലമായി നിയന്ത്രിക്കുന്നു. കൗതുകകരമെന്നു പറയട്ടെ, SCD യുടെ നോക്കൗട്ട് അല്ലെങ്കിൽ നിരോധനം ഫോസ്ഫോറിലേഷൻ വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിനും AMP-ആക്ടിവേറ്റഡ് പ്രോട്ടീൻ കൈനാസ് (AMPK) [71], [72], [73] സജീവമാക്കുന്നതിനും ഇടയാക്കുന്നു, കൂടാതെ Nrf2 ന്റെ അഭാവത്തിൽ SCD ലെവലുകൾ ഉണ്ടെന്ന് ഊഹിക്കാം. വർദ്ധിപ്പിക്കും, അതാകട്ടെ AMPK പ്രവർത്തനം കുറയ്ക്കുകയും ചെയ്യും. Nrf2-KO എലികളുടെ കരളിൽ [68] നിരീക്ഷിച്ച AMPK യുടെ കുറഞ്ഞ പ്രോട്ടീൻ അളവ് ഇത് കൂടുതൽ സങ്കീർണ്ണമാക്കാം, ഇത് Keap1-KD യുടെ കരളിൽ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യപ്പെട്ട വർദ്ധിച്ച AMPK ലെവലുമായി അടുത്ത യോജിപ്പിലാണ്. എലികൾ [74]. AMPK പ്രവർത്തനം കുറയുന്നതിന്റെ ഒരു അനന്തരഫലമാണ്, അതിന്റെ ഇൻഹിബിറ്ററി ഫോസ്ഫോറിലേഷന്റെ (സെർ79-ൽ) അസറ്റൈൽ-കോഎ കാർബോക്‌സിലേസിന്റെ (ACC) [75] ആശ്വാസം, Nrf2 സജീവമാക്കൽ [2] വഴി ഇത് നിയന്ത്രിതമല്ലാത്തതിനാൽ Nrf70 ന്റെ അഭാവത്തിൽ ഇത് കൂടുതൽ ട്രാൻസ്‌ക്രിപ്‌ഷണലായി നിയന്ത്രിക്കപ്പെടാം. ]. ഉയർന്ന എസിസി പ്രവർത്തനം, എസിസിയുടെ അടിവസ്ത്രമായ അസറ്റൈൽ-കോഎയുടെ ഉൽപ്പാദനം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്ന നിയന്ത്രിത സിഎൽ എക്‌സ്‌പ്രഷനുമായി ചേർന്ന്, ആത്യന്തികമായി എസിസി ഉൽപ്പന്നമായ മലോനൈൽ-കോഎയുടെ അളവ് വർദ്ധിപ്പിച്ചേക്കാം. ഉയർന്ന അളവിലുള്ള മലോനൈൽ-കോഎ സിപിടിയെ തടയും, അതുവഴി മൈറ്റോകോണ്ട്രിയയിലേക്കുള്ള ഫാറ്റി ആസിഡുകളുടെ ഗതാഗതം കുറയുന്നു. അവസാനമായി, പ്ലാസ്മയിലും മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ മെംബ്രണുകളിലും ഫാറ്റി ആസിഡുകൾ ഇറക്കുമതി ചെയ്യുന്ന ഒരു ട്രാൻസ്‌ലോക്കേസായ CD2 [36] ന്റെ പ്രകടനത്തെ Nrf76 പോസിറ്റീവായി നിയന്ത്രിക്കുന്നു. അങ്ങനെ, മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ എഫ്എഒയുടെ കാര്യക്ഷമതയെ Nrf2 ബാധിച്ചേക്കാവുന്ന ഒരു സംവിധാനം മൈറ്റോകോൺ‌ഡ്രിയയിലേക്കുള്ള ലോംഗ്-ചെയിൻ ഫാറ്റി ആസിഡുകളുടെ ഇറക്കുമതി നിയന്ത്രിക്കുക എന്നതാണ്.
നേരിട്ടുള്ള ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷണൽ റെഗുലേഷനു പുറമേ, സെല്ലുലാർ റെഡോക്സ് മെറ്റബോളിസത്തിൽ അതിന്റെ ഫലങ്ങളാൽ മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ എഫ്എഒയുടെ കാര്യക്ഷമതയും Nrf2 മാറ്റിയേക്കാം. സെല്ലുലാർ റെഡോക്സ് നിലയെ ഓക്‌സിഡൈസ് ചെയ്ത അവസ്ഥയിലേക്ക് മാറ്റുന്ന അവസ്ഥകൾ Nrf2 പ്രവർത്തനം കുറവായിരിക്കുമ്പോഴോ ഇല്ലാതിരിക്കുമ്പോഴോ ഇത് പ്രത്യേകിച്ചും പ്രസക്തമായേക്കാം. തീർച്ചയായും, നിരവധി FAO എൻസൈമുകൾ റെഡോക്സ് മാറ്റങ്ങളോട് സംവേദനക്ഷമതയുള്ളതായി തിരിച്ചറിഞ്ഞിട്ടുണ്ട്. അത്തരത്തിലുള്ള ഒരു എൻസൈം വളരെ നീണ്ട-ചെയിൻ അസൈൽ-കോഎ ഡിഹൈഡ്രജനേസ് (വിഎൽസിഎഡി) ആണ്, ഇത് മനുഷ്യ കോശങ്ങളിലെ പാൽമിറ്റോയിൽ-കോഎ ഡീഹൈഡ്രജനേഷൻ പ്രവർത്തനത്തിന് 80% ത്തിലധികം സംഭാവന നൽകുന്നു [77]. രസകരമെന്നു പറയട്ടെ, ഹർഡ് et al. [78] വിഎൽസിഎഡിയിൽ സിസ്റ്റൈൻ അവശിഷ്ടങ്ങൾ അടങ്ങിയിട്ടുണ്ടെന്ന് കാണിക്കുന്നു, അത് ഒറ്റപ്പെട്ട എലി ഹൃദയം മൈറ്റോകോണ്ട്രിയയെ H2O2 ലേക്ക് എക്സ്പോഷർ ചെയ്യുമ്പോൾ അവയുടെ റെഡോക്സ് അവസ്ഥയെ ഗണ്യമായി മാറ്റുന്നു. കൂടാതെ, Cys238-ലെ മ്യൂറിൻ ഹെപ്പാറ്റിക് VLCAD-ന്റെ S-നൈട്രോസൈലേഷൻ എൻസൈമിന്റെ [79] കാറ്റലറ്റിക് കാര്യക്ഷമത മെച്ചപ്പെടുത്തുന്നു, അതേ സിസ്റ്റൈന്റെ ഓക്‌സിഡേഷൻ വിപരീത ഫലമുണ്ടാക്കാൻ സാധ്യതയുണ്ട്, ഇത് ആത്യന്തികമായി മൈറ്റോകോണ്ട്രിയൽ FAO യുടെ കാര്യക്ഷമത കുറയ്ക്കുന്നു. അതിനാൽ, WT, Nrf2-KO, അല്ലെങ്കിൽ Keap1-KO MEFs [65] എന്നിവയിൽ VLCAD ന്റെ എക്സ്പ്രഷൻ ലെവലുകൾ കാര്യമായി വ്യത്യാസപ്പെട്ടിട്ടില്ലെങ്കിലും ഉയർന്ന തലങ്ങൾ കാരണം Nrf2 ന്റെ അഭാവത്തിൽ VLCAD ന്റെ എൻസൈം പ്രവർത്തനം കുറവായിരിക്കാം. ROS-ന്റെ.
ഈ കണ്ടെത്തലുകളെയെല്ലാം അടിസ്ഥാനമാക്കി, ഇത് നിർദ്ദേശിക്കാവുന്നതാണ് (ചിത്രം 3): Nrf2 ന്റെ അഭാവത്തിൽ, ME1, IDH1, G6PD, PGD എന്നിവയുടെ എക്സ്പ്രഷൻ കുറയുന്നത് കാരണം NADPH ലെവലുകൾ കുറവാണ്. ബയോസിന്തസിസിലും പുനരുജ്ജീവനത്തിലും പങ്കെടുക്കുന്ന എൻസൈമുകളുടെ പ്രകടനത്തിലെ കുറവ്, ഓക്സിഡൈസ്ഡ് ഗ്ലൂട്ടത്തയോണിന്റെ കുറഞ്ഞ രൂപത്തിലേക്ക് പരിവർത്തനം ചെയ്യുന്നതിന് ആവശ്യമായ NADPH ന്റെ താഴ്ന്ന നിലകൾ എന്നിവ കാരണം കുറഞ്ഞ ഗ്ലൂട്ടത്തയോണിന്റെ അളവ് കുറവാണ്. ME1 ന്റെ താഴ്ന്ന പദപ്രയോഗം മൈറ്റോകോൺഡ്രിയയിലേക്ക് പ്രവേശിക്കുന്ന പൈറുവേറ്റ് കുളം കുറയ്ക്കും, ഗ്ലൈക്കോളിസിസ് പൈറുവേറ്റിന്റെ പ്രധാന ഉറവിടമായി മാറുന്നു. NADH-ന്റെ ജനറേഷൻ മന്ദഗതിയിലാണ്, ഇത് സങ്കീർണ്ണമായ I ന്റെ പ്രവർത്തനരഹിതമായ പ്രവർത്തനത്തിനും മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ROS ഉൽപാദനം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിനും ഇടയാക്കുന്നു. ഫാറ്റി ആസിഡ് ഓക്‌സിഡേഷൻ കാര്യക്ഷമമല്ലാത്തതിനാൽ FAD-നെ FADH2-ലേക്ക് കുറയ്ക്കുന്നതും മന്ദഗതിയിലാണ്. UbQH2 സക്സിനേറ്റ് ഡീഹൈഡ്രജനേസിന്റെ [2] ഒരു ആക്റ്റിവേറ്റർ ആയതിനാൽ, അതിന്റെ രൂപീകരണം മന്ദഗതിയിലാകുന്നത് സുക്സിനേറ്റ് ഡീഹൈഡ്രജനേസിന്റെ എൻസൈം പ്രവർത്തനത്തെ കുറച്ചേക്കാം. സൂപ്പർഓക്സൈഡിന്റെയും ഹൈഡ്രജൻ പെറോക്സൈഡിന്റെയും വർദ്ധിച്ച അളവ് സങ്കീർണ്ണമായ II പ്രവർത്തനത്തെ തടയും [80]. ഫാറ്റി ആസിഡ് ഓക്‌സിഡേഷന്റെ കുറഞ്ഞ കാര്യക്ഷമത, മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ശ്വസനത്തിനും ഓക്സിഡേറ്റീവ് ഫോസ്ഫോറിലേഷനിൽ എടിപി ഉൽപ്പാദനത്തിനും സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റ് ലഭ്യത കുറയുന്നതിന് കാരണമാകുന്നു. ഒരു നഷ്ടപരിഹാര സംവിധാനം എന്ന നിലയിൽ, ഗ്ലൈക്കോളിസിസ് മെച്ചപ്പെടുത്തുന്നു. ??m നിലനിർത്താനുള്ള ശ്രമത്തിൽ ATP സിന്തേസ് ഒരു ATPase ആയി വിപരീതമായി പ്രവർത്തിക്കുന്നു.
WT യുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ Nrf2-KO എലികളുടെ കരളിന് മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ഉള്ളടക്കം കുറവാണ് (മൈറ്റോകോൺ‌ഡ്രിയലിന്റെയും ന്യൂക്ലിയർ ഡിഎൻ‌എയുടെയും അനുപാതം നിർണ്ണയിക്കുന്നത്); ഇത് WT, Nrf24-KO എലികളിൽ 2-മണിക്കൂർ വേഗത്തിൽ കുറയുന്നു; ഇതിനു വിപരീതമായി, സാധാരണ ഭക്ഷണ സാഹചര്യങ്ങളിൽ WT യിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമല്ലെങ്കിലും, ഉയർന്ന Nrf2 പ്രവർത്തനമുള്ള എലികളിലെ മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ഉള്ളടക്കത്തെ ഉപവാസം ബാധിക്കില്ല [82]. രസകരമെന്നു പറയട്ടെ, Nrf2 ആക്റ്റിവേറ്റർ (R)-?-lipoic ആസിഡ് [83], [84], [85] കൊണ്ടുള്ള സപ്ലിമെന്റേഷൻ 3T3-L1 അഡിപ്പോസൈറ്റുകളിൽ [86] മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ബയോജെനിസിസ് പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നു. ന്യൂക്ലിയർ ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷണൽ റെഗുലേറ്ററുകളുടെ രണ്ട് വിഭാഗങ്ങൾ മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ബയോജെനിസിസിൽ നിർണായക പങ്ക് വഹിക്കുന്നു. അഞ്ച് റെസ്പിറേറ്ററി കോംപ്ലക്സുകളുടെ ജീനുകളുടെ എൻകോഡിംഗ് ഉപയൂണിറ്റുകൾ, മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ട്രാൻസ്ലേഷൻ ഘടകങ്ങൾ, മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ മാട്രിക്സിൽ പ്രാദേശികവൽക്കരിച്ച ഹീം ബയോസിന്തറ്റിക് എൻസൈമുകൾ എന്നിവ നിയന്ത്രിക്കുന്ന ന്യൂക്ലിയർ റെസ്പിറേറ്ററി ഘടകങ്ങൾ11, 2 എന്നിവ പോലുള്ള ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഘടകങ്ങളാണ് ഒന്നാം ക്ലാസ് [88]. പിയന്റഡോസി തുടങ്ങിയവർ. [89] ന്യൂക്ലിയർ റെസ്പിറേറ്ററി ഫാക്ടർ 2-ന്റെ Nrf1-ആശ്രിത ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷണൽ അപ്റെഗുലേഷൻ മൈറ്റോകോണ്ട്രിയൽ ബയോജെനിസിസിനെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുകയും കാർഡിയോടോക്സിക് ആന്ത്രാസൈക്ലിൻ കീമോതെറാപ്പിക് ഏജന്റായ ഡോക്‌സോറോബിസിൻ സൈറ്റോടോക്സിസിറ്റിയിൽ നിന്ന് സംരക്ഷിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. വിപരീതമായി, Zhang et al. [82] Nrf2-ന്റെ ജനിതക സജീവമാക്കൽ മുറൈൻ കരളിലെ ന്യൂക്ലിയർ റെസ്പിറേറ്ററി ഫാക്ടർ 1-ന്റെ അടിസ്ഥാന mRNA പ്രകടനത്തെ ബാധിക്കില്ലെന്ന് റിപ്പോർട്ട് ചെയ്തിട്ടുണ്ട്.
മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ബയോജെനിസിസിൽ നിർണായകമായ പ്രവർത്തനങ്ങളുള്ള ന്യൂക്ലിയർ ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷണൽ റെഗുലേറ്ററുകളുടെ രണ്ടാം ക്ലാസ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷണൽ കോക്‌ടിവേറ്ററുകളാണ്, പെറോക്സിസോം പ്രോലിഫെറേറ്റർ-ആക്‌റ്റിവേറ്റഡ് റിസപ്റ്റർ? കോക്ടിവേറ്ററുകൾ (പിജിസി)1? കൂടാതെ 1?, ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഘടകങ്ങൾ, ബേസൽ ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷണൽ, ആർഎൻഎ-സ്പ്ലിസിംഗ് മെഷിനറി, ഹിസ്റ്റോൺ-മോഡിഫൈയിംഗ് എൻസൈമുകൾ [88], [90], [91] എന്നിവയുമായി സംവദിക്കുന്നു. PGC1 ഫാമിലി ഓഫ് കോ ആക്‌റ്റിവേറ്ററുകളുടെ പ്രകടനത്തെ നിരവധി പാരിസ്ഥിതിക സിഗ്നലുകൾ സ്വാധീനിക്കുന്നു. Nrf2 ആക്റ്റിവേറ്റർ സൾഫോറാഫേൻ ഉപയോഗിച്ചുള്ള ഹ്യൂമൻ ഫൈബ്രോബ്ലാസ്റ്റുകളുടെ ചികിത്സ മൈറ്റോകോണ്ട്രിയൽ പിണ്ഡത്തിലും PGC1-ന്റെ ഇൻഡക്ഷനിലും വർദ്ധനവിന് കാരണമാകുന്നു. കൂടാതെ PGC1? [92], ഈ പഠനത്തിൽ Nrf2-നെ ആശ്രയിക്കാനുള്ള സാധ്യത പരിശോധിച്ചിട്ടില്ലെങ്കിലും. എന്നിരുന്നാലും, കീപ്2 ജീൻ ഹൈപ്പോമോർഫിക് നോക്ക്ഡൗൺ (db/db:Keap1flox/?:Nrf1+/+) അല്ലെങ്കിൽ തടസ്സപ്പെട്ട (db/db:Keap2flox/?:Nrf1?/?) Nrf2 സജീവമാക്കിയ പ്രമേഹ എലികൾക്ക് കുറഞ്ഞ ഹെപ്പാറ്റിക് PGC1 ഉണ്ടോ? മൃഗങ്ങളെ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിനേക്കാൾ എക്സ്പ്രഷൻ ലെവലുകൾ (db/db:Keap1flox/+:Nrf2+/+) [93]. PGC1-ന് mRNA ലെവലിൽ വ്യത്യാസമില്ലേ? WT അല്ലെങ്കിൽ Nrf2-KO അല്ലാത്ത ഡയബറ്റിക് എലികളുടെ കരളിൽ കാണപ്പെടുന്നു, എന്നാൽ Nrf2-ഓവർ എക്സ്പ്രെസിംഗ് (Keap1-KD, കരൾ-നിർദ്ദിഷ്ട Keap1-KO) മൃഗങ്ങളിൽ ഈ അളവ് കുറവാണ് [82]. ശ്രദ്ധേയമായി, 24 മണിക്കൂർ ഉപവാസം PGC1 ന്റെ അളവ് വർദ്ധിപ്പിക്കുമോ? എല്ലാ ജനിതകരൂപങ്ങളുടെയും എലികളുടെ കരളിൽ mRNA, എന്നാൽ WT അല്ലെങ്കിൽ Nrf2-ഓവർ എക്സ്പ്രെസിംഗ് എലികളെ അപേക്ഷിച്ച് Nrf2-KO കരളിൽ വർദ്ധനവ് വളരെ കൂടുതലാണ്. WT യുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ, Nrf2-KO എലികൾ സെപ്റ്റിക് അണുബാധയോ അണുബാധ മൂലം ശ്വാസകോശത്തിന് ഗുരുതരമായ ക്ഷതമോ അനുഭവിക്കുന്നത് ന്യൂക്ലിയർ റെസ്പിറേറ്ററി ഫാക്ടർ 1, PGC1 എന്നിവയുടെ ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷണൽ അപ്റെഗുലേഷൻ കാണിക്കുന്നുണ്ടോ? [94], [95]. ന്യൂക്ലിയർ റെസ്പിറേറ്ററി ഫാക്ടർ 2, PGC1 എന്നിവയുടെ അളവ് നിലനിർത്തുന്നതിൽ Nrf1 ന്റെ പങ്ക് എന്ന് ഈ നിരീക്ഷണങ്ങൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നു? സങ്കീർണ്ണവും സമ്മർദ്ദത്തിന്റെ സാഹചര്യങ്ങളിൽ ഏറ്റവും പ്രാധാന്യമർഹിക്കുന്നതുമാണ്.
മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ പ്രോട്ടീനുകളെ എൻകോഡ് ചെയ്യുന്ന ജീനുകളുടെ പ്രകടനത്തിന് പുറമേ, മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ബയോജെനിസിസിന് ന്യൂക്ലിയോടൈഡുകളുടെ സമന്വയം ആവശ്യമാണ്. Nrf2-ന്റെ ജനിതക സജീവമാക്കൽ, പെന്റോസ് ഫോസ്ഫേറ്റ് പാതയും ഫോളേറ്റ്, ഗ്ലൂട്ടാമൈൻ എന്നിവയുടെ മെറ്റബോളിസവും നിയന്ത്രിക്കുന്നതിലൂടെ പ്യൂരിൻ ബയോസിന്തസിസ് വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു, പ്രത്യേകിച്ച് അതിവേഗം പെരുകുന്ന കോശങ്ങളിൽ (ചിത്രം 2) [24]. മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ സെറിൻ/ത്രിയോണിൻ പ്രോട്ടീൻ കൈനസ് PTEN-ഇൻഡ്യൂസ്ഡ് പുട്ടേറ്റീവ് കൈനസ് 1 (PINK1) യ്‌ക്കായുള്ള മ്യൂട്ടന്റ് ഡ്രോസോഫിലയുടെ ട്രാൻസ്‌ക്രിപ്‌റ്റോമിന്റെ അപഗ്രഥനത്തിന്റെ വിശകലനം കാണിക്കുന്നത് മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ അപര്യാപ്തത വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിലേക്ക് നയിക്കുന്നു എന്നാണ്. PINK96 കുറവിന്റെ ന്യൂറോടോക്സിക് അനന്തരഫലങ്ങൾക്കെതിരായ സംരക്ഷണത്തിനുള്ള ഒരു സംവിധാനത്തെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു. Nrf1 ഫോസ്ഫോറിബോസിൽ പൈറോഫോസ്ഫേറ്റ് അമിഡോട്രാൻസ്ഫെറേസിന്റെ (പിപിഎടി) പ്രകടനത്തെ നിയന്ത്രിക്കുന്നു, ഇത് ഡി നോവോ പ്യൂരിൻ ന്യൂക്ലിയോടൈഡ് ബയോസിന്തറ്റിക് പാത്ത്വേയിലേക്കും മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ മെത്തിലിനെറ്റെട്രാഹൈഡ്രോഫോളേറ്റ് ഡിഹൈഡ്രോജനേസ് 2 (MTHFD2) (ചിത്രം 2) എന്നിവയിലേക്കുള്ള പ്രവേശനത്തെ ഉത്തേജിപ്പിക്കുന്നു. രണ്ടാമത്തേത് ദ്രുതഗതിയിൽ വളരുന്ന കോശങ്ങളിലെ പ്യൂരിൻ ബയോസിന്തസിസിനുള്ള വൺ-കാർബൺ യൂണിറ്റുകളുടെ സ്രോതസ്സുകളായി ഗ്ലൈസിൻ, ഫോർമാറ്റ് എന്നിവ നൽകുന്നതിൽ നിർണായകമായ ഡീഹൈഡ്രജനേസ്, സൈക്ലോഹൈഡ്രോലേസ് പ്രവർത്തനങ്ങളുള്ള ഒരു ബൈഫങ്ഷണൽ എൻസൈം ആണ് [2]. അതിനാൽ Nrf97 ആക്ടിവേഷൻ സംരക്ഷിതമാകാനും PINK2 ന്യൂനതയിൽ മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ അപര്യാപ്തത മാറ്റാനും സാധ്യതയുണ്ട്. തീർച്ചയായും, സൾഫോറഫേൻ അല്ലെങ്കിൽ ട്രൈറ്റെർപെനോയിഡ് RTA-1 വഴി Nrf2-ന്റെ ഫാർമക്കോളജിക്കൽ ആക്റ്റിവേഷൻ ??m പുനഃസ്ഥാപിക്കുകയും ഡോപാമൈൻ വിഷബാധയ്‌ക്കെതിരെ PINK408- കുറവുള്ള കോശങ്ങളെ സംരക്ഷിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു [1]. അടിസ്ഥാന സംവിധാനങ്ങൾ സങ്കീർണ്ണമാണെന്ന് തോന്നുമെങ്കിലും, ന്യൂക്ലിയോടൈഡ് ബയോസിന്തസിസ് വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിലൂടെയും നിർണായകമായ ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഘടകങ്ങളുടെയും കോ ആക്റ്റിവേറ്ററുകളുടെയും എക്സ്പ്രഷൻ ലെവലുകളെ സ്വാധീനിച്ചുകൊണ്ട് Nrf98 പ്രവർത്തനം മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ബയോജെനിസിസിനെ ബാധിച്ചേക്കാമെന്ന് ഈ കണ്ടെത്തലുകൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നു.
നേരിട്ടുള്ള തെളിവുകൾ എല്ലായ്‌പ്പോഴും ലഭ്യമല്ലെങ്കിലും, മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ഇന്റഗ്രിറ്റിക്ക്, പ്രത്യേകിച്ച് ഓക്സിഡേറ്റീവ് സ്ട്രെസ് ഉള്ള സാഹചര്യങ്ങളിൽ Nrf2 പ്രധാനമാണെന്ന് ശക്തമായ സൂചനകളുണ്ട്. എൻആർഎഫ്2 ആക്റ്റിവേറ്റർ സൾഫോറാഫേന്റെ ഒരു ഡോസ് നൽകിയ എലികളുടെ തലച്ചോറിൽ നിന്നും കരളിൽ നിന്നും വേർതിരിച്ചെടുത്ത മൈറ്റോകോൺഡ്രിയ, ടെർട്ട്-ബ്യൂട്ടൈൽഹൈഡ്രോപെറോക്സൈഡ് [99], [100] എന്ന ഓക്‌സിഡന്റ് മൂലമുണ്ടാകുന്ന മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ പെർമബിലിറ്റി ട്രാൻസിഷൻ പോർ (mPTP) തുറക്കുന്നതിനെ പ്രതിരോധിക്കും. 1500 Da വരെ പിണ്ഡമുള്ള തന്മാത്രകളിലേക്ക് മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ആന്തരിക സ്തരത്തെ കടന്നുപോകാൻ അനുവദിക്കുന്ന ഒരു സമുച്ചയമായ mPTP, F0F1-ATP സിന്തേസിന്റെ ഡൈമറുകളിൽ നിന്ന് രൂപപ്പെട്ടതായി അടുത്തിടെ തിരിച്ചറിഞ്ഞു [101]. mPTP തുറക്കുന്നതിനുള്ള സൾഫോറഫേൻ-മധ്യസ്ഥത പ്രതിരോധം വർദ്ധിച്ച ആന്റിഓക്‌സിഡന്റ് പ്രതിരോധവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു, കൂടാതെ മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ GSH, ഗ്ലൂട്ടത്തയോൺ പെറോക്‌സിഡേസ് 1, മാലിക് എൻസൈം 3, തയോറെഡോക്സിൻ 2 എന്നിവയുടെ അളവ് മൈറ്റോകോണ്‌ഡ്രിയൽ ഭിന്നസംഖ്യകളിൽ നിയന്ത്രിക്കപ്പെടുന്നു [sultreaphane-100]
ഇലക്ട്രോഫിലിക് ലിപിഡ് പെറോക്‌സിഡേഷൻ ഉൽപ്പന്നമായ 4-ഹൈഡ്രോക്‌സി-2-നോനെനൽ മൂലമുണ്ടാകുന്ന മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ പ്രോട്ടീൻ തകരാറും ശ്വസനത്തിലെ തകരാറും സൾഫോറഫെയ്ൻ ചികിത്സിച്ച എലികളുടെ സെറിബ്രൽ കോർട്ടക്‌സിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ച മൈറ്റോകോൺഡ്രിയയിൽ ദുർബലമാകുന്നു [102]. എലിയുടെ വൃക്കസംബന്ധമായ എപ്പിത്തീലിയൽ കോശങ്ങളിലും വൃക്കയിലും, സൾഫോറഫെയ്ൻ സിസ്പ്ലാറ്റിൻ, ജെന്റാമൈസിൻ-ഇൻഡ്യൂസ്ഡ് വിഷാംശം, ??m[103], [104] എന്നിവയിൽ നിന്ന് സംരക്ഷിക്കുന്നു. ഓക്സിഡൻറുകൾ (സൂപ്പറോക്സൈഡ്, ഹൈഡ്രജൻ പെറോക്സൈഡ്, പെറോക്‌സിനൈട്രൈറ്റ്), ഇലക്‌ട്രോഫിലുകൾ (4-ഹൈഡ്രോക്‌സി-2-നോനെനൽ, അക്രോലിൻ) എന്നിവയ്‌ക്കെതിരായ സംരക്ഷണവും മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ആന്റിഓക്‌സിഡന്റ് പ്രതിരോധത്തിന്റെ വർദ്ധനവും എലി അയോർട്ടിക് മിനുസമാർന്ന പേശി കോശങ്ങളെ സൾഫോറഫെയ്ൻ ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിക്കുമ്പോൾ നിരീക്ഷിക്കപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട് [105] ]. കോൺട്രാസ്റ്റ്-ഇൻഡ്യൂസ്ഡ് അക്യൂട്ട് കിഡ്‌നി ക്ഷതത്തിന്റെ ഒരു മാതൃകയിൽ, ജിഎസ്‌കെ 2-നെ തടയുന്നതിന്റെ ഫലമായി Nrf3 സജീവമാക്കുന്നതിലൂടെ, mPTP തുറക്കുന്നതും മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ വീക്കവും തടയുന്നതുൾപ്പെടെയുള്ള സംരക്ഷിത ഫലങ്ങൾ കൈകാലുകളുടെ ഇസ്‌കെമിക് പ്രീ കണ്ടീഷനിംഗിന് ഉണ്ടെന്ന് അടുത്തിടെ കാണിച്ചിരുന്നു. [106].
പ്രവർത്തനരഹിതമായ മൈറ്റോകോൺ‌ഡ്രിയയെ തിരഞ്ഞെടുത്ത് ഓട്ടോഫാഗോസോമുകളാൽ വിഴുങ്ങുകയും ലൈസോസോമുകളിലേക്ക് വിതരണം ചെയ്യുകയും കോശത്താൽ നശിപ്പിക്കപ്പെടുകയും പുനരുപയോഗം ചെയ്യുകയും ചെയ്യുന്ന മൈറ്റോഫാഗി, മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ഹോമിയോസ്റ്റാസിസിന് അത്യന്താപേക്ഷിതമാണ് [107], [108]. Nrf2 ഉം മൈറ്റോഫാഗിയും തമ്മിൽ ഒരു കാരണവശാലും ബന്ധമൊന്നും സ്ഥാപിക്കപ്പെട്ടിട്ടില്ലെങ്കിലും, മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ഗുണനിലവാര നിയന്ത്രണത്തിൽ ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഘടകം മൈറ്റോഫാഗിയിൽ ഒരു പങ്കുവഹിച്ചുകൊണ്ട് പ്രധാനമായേക്കാം എന്നതിന് തെളിവുകളുണ്ട്. ഓക്സിഡേറ്റീവ് സ്ട്രെസിന്റെ സാഹചര്യങ്ങളിൽ ഇത് പ്രത്യേകിച്ചും പ്രാധാന്യമർഹിക്കുന്നു. അങ്ങനെ, സെപ്‌സിസിന്റെ ഒരു മാതൃകയിൽ, ഓട്ടോഫാഗോസോം മാർക്കർ MAP1 ലൈറ്റ് ചെയിൻ 3-II (LC3-II), കാർഗോ പ്രോട്ടീൻ p62 എന്നിവയുടെ അളവ് വർദ്ധിക്കുന്നത് WT എലികളെ അപേക്ഷിച്ച് Nrf24-KO-ൽ അടിച്ചമർത്തപ്പെടുന്നു [2] . മൈറ്റോഫാഗിയുടെ ഒരു ചെറിയ മോളിക്യൂൾ ഇൻഡുസർ (p109-മെഡിയേറ്റഡ് മൈറ്റോഫാഗി ഇൻഡുസർ, PMI എന്ന് വിളിക്കപ്പെടുന്നു) അടുത്തിടെ കണ്ടെത്തി; ഈ 62-ഡിഫെനൈൽ-1,4-ട്രയാസോൾ സംയുക്തം യഥാർത്ഥത്തിൽ രൂപകൽപ്പന ചെയ്തിരിക്കുന്നത് ഒരു Nrf1,2,3 ആക്റ്റിവേറ്ററായാണ്, ഇത് കീപ്2 [1] യുമായുള്ള ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഘടകത്തിന്റെ പ്രതിപ്രവർത്തനത്തെ തടസ്സപ്പെടുത്തുന്നു. Nrf110 ജനിതകപരമായി ക്രമീകരിച്ചിരിക്കുന്ന സെല്ലുകൾക്ക് സമാനമായി (Keap2-KD അല്ലെങ്കിൽ Keap1-KO), PMI ലേക്ക് തുറന്നിരിക്കുന്ന സെല്ലുകൾക്ക് ഉയർന്ന വിശ്രമമുണ്ട്. പ്രധാനമായും, WT സെല്ലുകളുടെ PMI ചികിത്സയ്ക്ക് ശേഷം നിരീക്ഷിക്കപ്പെടുന്ന മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ LC1 ലോക്കലൈസേഷന്റെ വർദ്ധനവ് Nrf3-KO സെല്ലുകളിൽ സംഭവിക്കുന്നില്ല, ഇത് Nrf2-ന്റെ പങ്കാളിത്തം സൂചിപ്പിക്കുന്നു.
അവസാനമായി, കരൾ വിഭാഗങ്ങളുടെ അൾട്രാസ്ട്രക്ചറൽ വിശകലനം, Nrf2-KO യുടെ ഹെപ്പറ്റോസൈറ്റുകളിൽ ക്രിസ്റ്റയും തടസ്സപ്പെട്ട ചർമ്മവും വീർത്ത മൈറ്റോകോൺഡ്രിയയുടെ സാന്നിധ്യം വെളിപ്പെടുത്തി, പക്ഷേ WT അല്ല, 24 ആഴ്ചകളായി ഉയർന്ന കൊഴുപ്പ് ഭക്ഷണം നൽകിയ എലികൾ; ശ്രദ്ധേയമായി, ഈ കരളുകൾ ഓക്സിഡേറ്റീവ് സ്ട്രെസ്, വീക്കം എന്നിവയുടെ വ്യക്തമായ തെളിവുകൾ കാണിക്കുന്നു [68]. ഓക്സിഡേറ്റീവ്, ഇൻഫ്ലമേറ്ററി സ്ട്രെസ് എന്നിവയിൽ മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ സമഗ്രത നിലനിർത്തുന്നതിൽ Nrf2 ന് നിർണായക പങ്ക് ഉണ്ടെന്ന് നിഗമനം ചെയ്യാം.
നിങ്ങളുടെ ഭക്ഷണത്തിൽ നിങ്ങൾക്ക് ലഭിക്കുന്ന ഏറ്റവും പ്രധാനപ്പെട്ട സസ്യ സംയുക്തങ്ങളിൽ ചിലതാണ് ഐസോത്തിയോസയനേറ്റുകൾ. ഈ വീഡിയോയിൽ ഞാൻ അവർക്കായി ഇതുവരെ ഉണ്ടാക്കിയിട്ടുള്ളതിൽ വച്ച് ഏറ്റവും സമഗ്രമായ കേസ് ഉണ്ടാക്കുന്നു. ചെറിയ ശ്രദ്ധാ കാലയളവ്? ചുവടെയുള്ള സമയ പോയിന്റുകളിലൊന്നിൽ ക്ലിക്കുചെയ്‌ത് നിങ്ങളുടെ പ്രിയപ്പെട്ട വിഷയത്തിലേക്ക് പോകുക. മുഴുവൻ ടൈംലൈൻ ചുവടെ.
പ്രധാന വിഭാഗങ്ങൾ:
മുഴുവൻ ടൈംലൈൻ:
മനുഷ്യ ശരീരത്തിലെ സെല്ലുലാർ ആന്റിഓക്‌സിഡന്റ് പ്രതിരോധ സംവിധാനത്തിൽ ഒരു പ്രധാന പങ്ക് വഹിക്കുന്ന ഒരു ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഘടകമാണ് Nrf2. ആന്റിഓക്‌സിഡന്റ് റെസ്‌പോൺസിവ് എലമെന്റ്, അല്ലെങ്കിൽ ARE, ജീനുകളുടെ ഒരു നിയന്ത്രണ സംവിധാനമാണ്. Nrf2, അല്ലെങ്കിൽ NF-E2-മായി ബന്ധപ്പെട്ട ഘടകം 2, പല തരത്തിലുള്ള സെല്ലുകളിലുടനീളം വൈവിധ്യമാർന്ന ARE- പ്രവർത്തിക്കുന്ന ജീനുകളെ നിയന്ത്രിക്കുന്നുവെന്ന് പല ഗവേഷണ പഠനങ്ങളും തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട്. സെല്ലുലാർ സംരക്ഷണത്തിലും കാർസിനോജെനിസിറ്റി വിരുദ്ധതയിലും Nrf2 ഒരു പ്രധാന പങ്ക് വഹിക്കുന്നുണ്ടെന്ന് കണ്ടെത്തി, ഇത് ന്യൂറോ ഡിജനറേറ്റീവ് രോഗങ്ങളുടെയും ഓക്സിഡേറ്റീവ് സ്ട്രെസ് മൂലമുണ്ടാകുന്ന ക്യാൻസറുകളുടെയും മാനേജ്മെന്റിൽ Nrf2 ഫലപ്രദമായ ചികിത്സയായിരിക്കാം എന്ന് തെളിയിക്കുന്നു. ഡോ. അലക്സ് ജിമെനെസ് ഡിസി, സിസിഎസ്ടി ഇൻസൈറ്റ്
നിരവധി ചോദ്യങ്ങൾ ഇപ്പോഴും തുറന്നിരിക്കുന്നുണ്ടെങ്കിലും, ലഭ്യമായ പരീക്ഷണാത്മക തെളിവുകൾ മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ഹോമിയോസ്റ്റാസിസിന്റെയും ഘടനാപരമായ സമഗ്രതയുടെയും പരിപാലനത്തിൽ Nrf2 ഒരു പ്രധാന പങ്ക് വഹിക്കുന്നുണ്ടെന്ന് വ്യക്തമായി സൂചിപ്പിക്കുന്നു. ഓക്സിഡേറ്റീവ്, ഇലക്ട്രോഫിലിക്, ഇൻഫ്ലമേറ്ററി സ്ട്രെസ് എന്നിവയുടെ സാഹചര്യങ്ങളിൽ ഈ പങ്ക് വളരെ നിർണായകമാണ്, എൻആർഎഫ് 2-മധ്യസ്ഥമായ സൈറ്റോപ്രൊട്ടക്റ്റീവ് പ്രതികരണങ്ങളെ നിയന്ത്രിക്കാനുള്ള കഴിവ് കോശത്തിന്റെയും ജീവജാലത്തിന്റെയും മൊത്തത്തിലുള്ള ആരോഗ്യത്തെയും നിലനിൽപ്പിനെയും സ്വാധീനിക്കുന്നു. മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ ഫംഗ്‌ഷനിൽ Nrf2 ന്റെ പങ്ക് ഈ ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഘടകം വഴി സംഘടിപ്പിക്കപ്പെട്ട വിശാലമായ സൈറ്റോപ്രൊട്ടക്റ്റീവ് മെക്കാനിസങ്ങളുടെ മറ്റൊരു പാളിയെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നു. മനുഷ്യന്റെ പല രോഗാവസ്ഥകൾക്കും ഓക്സിഡേറ്റീവ് സ്ട്രെസ്, വീക്കം, മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ അപര്യാപ്തത എന്നിവ അവയുടെ രോഗകാരിയുടെ അവശ്യ ഘടകങ്ങളായതിനാൽ, Nrf2-ന്റെ ഫാർമക്കോളജിക്കൽ ആക്റ്റിവേഷൻ രോഗം തടയുന്നതിനും ചികിത്സിക്കുന്നതിനും വാഗ്ദാനം ചെയ്യുന്നു. ഭാവിയിലെ ക്ലിനിക്കൽ ട്രയലുകളുടെ യുക്തിസഹമായ രൂപകൽപ്പനയ്ക്ക് Nrf2 മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ പ്രവർത്തനത്തെ ബാധിക്കുന്ന കൃത്യമായ സംവിധാനങ്ങളെക്കുറിച്ചുള്ള സമഗ്രമായ ധാരണ അത്യന്താപേക്ഷിതമാണ്, കൂടാതെ ചികിത്സാ ഫലപ്രാപ്തി നിരീക്ഷിക്കുന്നതിന് പുതിയ ബയോമാർക്കറുകൾ വാഗ്ദാനം ചെയ്തേക്കാം.
Sciencedirect.com/science/article/pii/S0891584915002129
മുകളിലെ ലേഖനത്തിന്റെ ഉദ്ദേശ്യം മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ പ്രവർത്തനത്തിൽ Nrf2-ന്റെ ഉയർന്നുവരുന്ന പങ്ക് ചർച്ചചെയ്യുകയും പ്രകടിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുക എന്നതായിരുന്നു. Nrf2, അല്ലെങ്കിൽ ന്യൂക്ലിയർ ഘടകം എറിത്രോയിഡ് 2-അനുബന്ധ ഘടകം, ഓക്സിഡന്റുകളോടുള്ള സെല്ലുലാർ പ്രതിരോധത്തിന്റെ ഉയർന്നുവരുന്ന റെഗുലേറ്ററാണ്, ഇത് ഓക്സിഡേറ്റീവ് സമ്മർദ്ദത്തിന് കാരണമാകുകയും സെല്ലുലാർ പ്രവർത്തനത്തെ ബാധിക്കുകയും വിഷാംശം, വിട്ടുമാറാത്ത രോഗം, ക്യാൻസർ എന്നിവയുടെ വികാസത്തിലേക്ക് നയിക്കുകയും ചെയ്യും. മനുഷ്യശരീരത്തിലെ ഓക്സിഡൻറുകളുടെ ഉൽപ്പാദനം കോശവിഭജനം, വീക്കം, രോഗപ്രതിരോധ പ്രവർത്തനം, സ്വയംഭോഗം, സമ്മർദ്ദ പ്രതികരണം എന്നിവയുൾപ്പെടെ വിവിധ ആവശ്യങ്ങൾക്ക് കാരണമാകുമെങ്കിലും, ആരോഗ്യപ്രശ്നങ്ങൾ തടയുന്നതിന് അവയുടെ അമിത ഉൽപാദനം നിയന്ത്രിക്കേണ്ടത് അത്യാവശ്യമാണ്. ഞങ്ങളുടെ വിവരങ്ങളുടെ വ്യാപ്തി കൈറോപ്രാക്റ്റിക്, നട്ടെല്ല് ആരോഗ്യ പ്രശ്‌നങ്ങളിൽ മാത്രമായി പരിമിതപ്പെടുത്തിയിരിക്കുന്നു. വിഷയം ചർച്ച ചെയ്യാൻ, ഡോ. ജിമെനെസിനോട് ചോദിക്കാൻ മടിക്കേണ്ടതില്ല അല്ലെങ്കിൽ ഞങ്ങളെ ബന്ധപ്പെടുക915-850-0900 .
ഡോ. അലക്സ് ജിമെനെസ് ക്യൂറേറ്റ് ചെയ്തത്
ഇതിൽ നിന്ന് പരാമർശിച്ചത്: Sciencedirect.com
പുറം വേദനലോകമെമ്പാടുമുള്ള വൈകല്യത്തിനും ജോലിസ്ഥലത്ത് ദിവസങ്ങൾ നഷ്ടപ്പെടുന്നതിനുമുള്ള ഏറ്റവും സാധാരണമായ കാരണങ്ങളിലൊന്നാണ്. ഡോക്ടർ ഓഫീസ് സന്ദർശനത്തിനുള്ള ഏറ്റവും സാധാരണമായ രണ്ടാമത്തെ കാരണം നടുവേദനയെ ആട്രിബ്യൂട്ട് ചെയ്യുന്നു, ഇത് അപ്പർ-റെസ്പിറേറ്ററി അണുബാധകളെക്കാൾ കൂടുതലാണ്. ജനസംഖ്യയുടെ ഏകദേശം 80 ശതമാനം പേർക്കും ജീവിതത്തിലുടനീളം ഒരിക്കലെങ്കിലും നടുവേദന അനുഭവപ്പെടും. നട്ടെല്ല് മറ്റ് മൃദുവായ ടിഷ്യൂകൾക്കിടയിൽ അസ്ഥികൾ, സന്ധികൾ, അസ്ഥിബന്ധങ്ങൾ, പേശികൾ എന്നിവയാൽ നിർമ്മിതമായ ഒരു സങ്കീർണ്ണ ഘടനയാണ്. ഇക്കാരണത്താൽ, പരിക്കുകൾ കൂടാതെ/അല്ലെങ്കിൽ വഷളായ അവസ്ഥകൾഹാർനിയേറ്റഡ് ഡിസ്ക്കുകൾ, ഒടുവിൽ നടുവേദനയുടെ ലക്ഷണങ്ങളിലേക്ക് നയിച്ചേക്കാം. സ്‌പോർട്‌സ് പരിക്കുകൾ അല്ലെങ്കിൽ വാഹനാപകട പരിക്കുകൾ പലപ്പോഴും നടുവേദനയുടെ ഏറ്റവും സാധാരണമായ കാരണമാണ്, എന്നിരുന്നാലും, ചിലപ്പോൾ ഏറ്റവും ലളിതമായ ചലനങ്ങൾക്ക് വേദനാജനകമായ ഫലങ്ങൾ ഉണ്ടാകാം. ഭാഗ്യവശാൽ, കൈറോപ്രാക്റ്റിക് കെയർ പോലുള്ള ഇതര ചികിത്സാ ഓപ്ഷനുകൾ, നട്ടെല്ല് ക്രമീകരണങ്ങളുടെയും മാനുവൽ കൃത്രിമത്വങ്ങളുടെയും ഉപയോഗത്തിലൂടെ നടുവേദന കുറയ്ക്കാൻ സഹായിക്കും, ആത്യന്തികമായി വേദന ആശ്വാസം മെച്ചപ്പെടുത്തുന്നു. �
***
പരിശീലനത്തിന്റെ പ്രൊഫഷണൽ വ്യാപ്തി *
ഇവിടെയുള്ള വിവരങ്ങൾ "മൈറ്റോകോൺഡ്രിയൽ പ്രവർത്തനത്തിൽ Nrf2 ന്റെ ഉയർന്നുവരുന്ന പങ്ക്"യോഗ്യതയുള്ള ആരോഗ്യപരിചരണ പ്രൊഫഷണലോ ലൈസൻസുള്ള ഫിസിഷ്യനോടോ ഉള്ള ബന്ധം മാറ്റിസ്ഥാപിക്കാൻ ഉദ്ദേശിച്ചുള്ളതല്ല, അത് മെഡിക്കൽ ഉപദേശമല്ല. യോഗ്യതയുള്ള ഒരു ഹെൽത്ത് കെയർ പ്രൊഫഷണലുമായുള്ള നിങ്ങളുടെ ഗവേഷണത്തിന്റെയും പങ്കാളിത്തത്തിന്റെയും അടിസ്ഥാനത്തിൽ ആരോഗ്യ സംരക്ഷണ തീരുമാനങ്ങൾ എടുക്കാൻ ഞങ്ങൾ നിങ്ങളെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നു.
ബ്ലോഗ് വിവരങ്ങളും സ്കോപ്പ് ചർച്ചകളും
ഞങ്ങളുടെ വിവര വ്യാപ്തി കൈറോപ്രാക്റ്റിക്, മസ്‌കുലോസ്‌കെലെറ്റൽ, ഫിസിക്കൽ മെഡിസിൻ, വെൽനസ്, സംഭാവന എറ്റിയോളജിക്കൽ എന്നിവയിൽ പരിമിതപ്പെടുത്തിയിരിക്കുന്നു വിസെറോസോമാറ്റിക് അസ്വസ്ഥതകൾ ക്ലിനിക്കൽ അവതരണങ്ങൾക്കുള്ളിൽ, അനുബന്ധ സോമാറ്റോവിസെറൽ റിഫ്ലെക്സ് ക്ലിനിക്കൽ ഡൈനാമിക്സ്, സബ്ലക്സേഷൻ കോംപ്ലക്സുകൾ, സെൻസിറ്റീവ് ആരോഗ്യ പ്രശ്നങ്ങൾ, കൂടാതെ/അല്ലെങ്കിൽ ഫങ്ഷണൽ മെഡിസിൻ ലേഖനങ്ങൾ, വിഷയങ്ങൾ, ചർച്ചകൾ.
ഞങ്ങൾ നൽകുകയും അവതരിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു ക്ലിനിക്കൽ സഹകരണം വിവിധ വിഷയങ്ങളിൽ നിന്നുള്ള വിദഗ്ധരുമായി. ഓരോ സ്പെഷ്യലിസ്റ്റും അവരുടെ പ്രൊഫഷണൽ പരിശീലന പരിധിയും ലൈസൻസിന്റെ അധികാരപരിധിയുമാണ് നിയന്ത്രിക്കുന്നത്. മസ്‌കുലോസ്‌കെലെറ്റൽ സിസ്റ്റത്തിന്റെ പരിക്കുകൾക്കോ തകരാറുകൾക്കോ വേണ്ടിയുള്ള പരിചരണത്തിനും പിന്തുണയ്‌ക്കും ഞങ്ങൾ ഫങ്ഷണൽ ഹെൽത്ത് & വെൽനസ് പ്രോട്ടോക്കോളുകൾ ഉപയോഗിക്കുന്നു.
ഞങ്ങളുടെ വീഡിയോകൾ, പോസ്റ്റുകൾ, വിഷയങ്ങൾ, വിഷയങ്ങൾ, സ്ഥിതിവിവരക്കണക്കുകൾ എന്നിവയുമായി ബന്ധപ്പെട്ടതും നേരിട്ടോ അല്ലാതെയോ ഞങ്ങളുടെ ക്ലിനിക്കൽ പ്രാക്ടീസ് സ്കോപ്പിനെ പിന്തുണയ്ക്കുന്ന ക്ലിനിക്കൽ വിഷയങ്ങൾ, പ്രശ്നങ്ങൾ, വിഷയങ്ങൾ എന്നിവ ഉൾക്കൊള്ളുന്നു.*
ഞങ്ങളുടെ ഓഫീസ് ന്യായമായും പിന്തുണാ ഉദ്ധരണികൾ നൽകാൻ ശ്രമിക്കുകയും ഞങ്ങളുടെ പോസ്റ്റുകളെ പിന്തുണയ്ക്കുന്ന പ്രസക്തമായ ഗവേഷണ പഠനമോ പഠനങ്ങളോ തിരിച്ചറിയുകയും ചെയ്തിട്ടുണ്ട്. റെഗുലേറ്ററി ബോർഡുകൾക്കും പൊതുജനങ്ങൾക്കും അഭ്യർത്ഥന പ്രകാരം ലഭ്യമായ ഗവേഷണ പഠനങ്ങളുടെ പകർപ്പുകൾ ഞങ്ങൾ നൽകുന്നു.
ഒരു പ്രത്യേക പരിചരണ പദ്ധതിയിലോ ചികിത്സാ പ്രോട്ടോക്കോളിലോ ഇത് എങ്ങനെ സഹായിക്കുമെന്നതിന്റെ അധിക വിശദീകരണം ആവശ്യമായ കാര്യങ്ങൾ ഞങ്ങൾ ഉൾക്കൊള്ളുന്നുവെന്ന് ഞങ്ങൾ മനസ്സിലാക്കുന്നു; അതിനാൽ, മുകളിലുള്ള വിഷയം കൂടുതൽ ചർച്ച ചെയ്യാൻ, ദയവായി ചോദിക്കാൻ മടിക്കേണ്ടതില്ല ഡോ. അലക്സ് ജിമെനെസ്, ഡിസി, അല്ലെങ്കിൽ ഞങ്ങളെ ബന്ധപ്പെടുക 915-850-0900.
നിങ്ങളെയും നിങ്ങളുടെ കുടുംബത്തെയും സഹായിക്കാൻ ഞങ്ങൾ ഇവിടെയുണ്ട്.
അനുഗ്രഹങ്ങൾ
ഡോ. അലക്സ് ജിമെനെസ് ഡിസി, എംഎസ്എസിപി, RN*, സി.സി.എസ്.ടി., ഐഎഫ്എംസിപി*, സി.ഐ.എഫ്.എം*, ATN*
ഇമെയിൽ: coach@elpasofunctionalmedicine.com
ലെ ഡോക്ടർ ഓഫ് ചിറോപ്രാക്റ്റിക് (ഡിസി) ആയി ലൈസൻസ് ചെയ്തു ടെക്സസ് & ന്യൂ മെക്സിക്കോ*
ടെക്സസ് ഡിസി ലൈസൻസ് # TX5807, ന്യൂ മെക്സിക്കോ DC ലൈസൻസ് # NM-DC2182
രജിസ്റ്റർ ചെയ്ത നഴ്‌സായി ലൈസൻസ് (RN*) in ഫ്ലോറിഡ
ഫ്ലോറിഡ ലൈസൻസ് RN ലൈസൻസ് # RN9617241 (നിയന്ത്രണ നമ്പർ. 3558029)
ഒതുക്കമുള്ള നില: മൾട്ടി-സ്റ്റേറ്റ് ലൈസൻസ്: പ്രാക്ടീസ് ചെയ്യാൻ അനുമതിയുണ്ട് 40 സംസ്ഥാനങ്ങൾ*
ഡോ. അലക്സ് ജിമെനെസ് DC, MSACP, RN* CIFM*, IFMCP*, ATN*, CCST
എന്റെ ഡിജിറ്റൽ ബിസിനസ് കാർഡ്
ചില വ്യക്തികൾക്ക് പാദരക്ഷകൾ നടുവേദനയ്ക്കും പ്രശ്‌നങ്ങൾക്കും കാരണമാകും. കണക്ഷൻ മനസ്സിലാക്കാൻ കഴിയും... കൂടുതല് വായിക്കുക
വ്യായാമം, ശാരീരികക്ഷമത, ശാരീരിക പ്രവർത്തനങ്ങൾ എന്നിവയിൽ ഏർപ്പെടുന്ന വ്യക്തികൾക്ക്, ഗ്ലൈക്കോജൻ എങ്ങനെയെന്ന് അറിയാൻ കഴിയും… കൂടുതല് വായിക്കുക
നടുവേദനയും പ്രശ്നങ്ങളും കൈകാര്യം ചെയ്യുന്ന വ്യക്തികൾക്ക്, എങ്ങനെ മെച്ചപ്പെടുത്താമെന്ന് അറിയാൻ കഴിയും… കൂടുതല് വായിക്കുക
ഭക്ഷ്യവിഷബാധയിൽ നിന്ന് കരകയറുന്ന വ്യക്തികളെ കുടലിൻ്റെ ആരോഗ്യം വീണ്ടെടുക്കാൻ ഏതൊക്കെ ഭക്ഷണങ്ങളാണ് കഴിക്കേണ്ടതെന്ന് അറിയുന്നത് സഹായിക്കുമോ?... കൂടുതല് വായിക്കുക
സ്ഥാനഭ്രംശം സംഭവിച്ച ഇടുപ്പിനുള്ള ചികിത്സാ ഉപാധികൾ അറിയുന്നത് വ്യക്തികളെ പുനരധിവാസവും വീണ്ടെടുക്കലും വേഗത്തിലാക്കാൻ സഹായിക്കുമോ? സ്ഥാനഭ്രംശം സംഭവിച്ച... കൂടുതല് വായിക്കുക
അക്യുപ്രഷർ സംയോജിപ്പിക്കുന്നത് പ്രകൃതിദത്ത ചികിത്സകൾ പരീക്ഷിക്കാൻ ആഗ്രഹിക്കുന്ന വ്യക്തികൾക്ക് ഫലപ്രദമായ ആശ്വാസവും ആനുകൂല്യങ്ങളും നൽകാനാവും… കൂടുതല് വായിക്കുക